微生物实验室标准操作程序

微生物实验室标准操作程序（共13篇）

1.微生物实验室标准操作程序 篇一

印章使用保管标准操作程序

为了加强公司的印章管理，合理的使用和保管印章，特制定本管理办法：

一、印章的刻制：

1、公司各部门因工作需要刻制印章的，必须写出书面申请并报总经理审批后方可刻制。

2、未经总经理批准，任何人不得私刻或改制公司的印章。

3、公司刻制的印章经总经理批准后，行政部要保留印模存查。

二、印章的使用：

1、各部门文件用印，应先填写“用印申请单”，经总经理批准后，连同已签发的文稿一并交鉴印人用印。

2、公司印章使用的范围：

（1）以公司名义上报政府管理部门的请示、报告和其他文件。（2）以公司名义向政府机关发出的重要公函和重要文件。（3）各部门以公司名义签署的合同书、意见书、协议书和会谈纪要等。

（4）各部门以公司名义上报的年、季、月报表等。（5）以公司名义办理的其他需签署印章的事项。

3、需注意的事项：

（1）鉴印人对未经总经理签发的文件，不得擅自用印。（2）公章施印时，鉴印人必须做好鉴印记录。鉴印人不在时，由代行鉴印人办理并填写鉴印记录。（3）公司印鉴的使用一律由总经理签字批准后鉴印人方可盖章。（4）未经总经理批准，公司严禁出具任何介绍信、证明等文书。如因工作需要或其他特殊情况确需开具时，必须经总经理签字后方可开出。

（5）持空白介绍信外出工作回来必须向公司汇报其介绍信的用途，未使用的必须交回。

（6）总经理不在或其他特殊情况下需用印的，必须经总经理电话同意或授权后方可用印，总经理回来后鉴印人应及时补办相关手续。

三、印章的保管：

1、有印章的部门必须安排专人负责保管及使用。

2、各类印章严禁带出公司。特殊情况下，必须经总经理批准，3、各部门印章如有遗失、误用或私自带出的，一切后果由印章保管人全权负责。公司除给予罚款外，情节严重的公司将依法追究其法律责任。

4、印章遗失时除立即向上级报告外，特殊情况还需依法公告作废。

四、印章的销毁：

1、各部门对不再使用的印章应及时上交公司行政部保存。

2、停止使用的印章保存一年后，行政部必须填写《销毁印章申请表》，报总经理审批后予以销毁。

本管理办法字制定之日起施行！

2.微生物实验室标准操作程序 篇二

目的基因的获得选择, 首要是选择和共享NCBI数据库 (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nucleotide) 的基因进行查阅, 资料查阅过程中我们可以体会到计算机运算和计算功能, 以及网络数据库丰富内容, 认识到计算机和网络是整个基因工程发展的平台作用。

目的基因获得可以设计相应的引物和材料进行PCR获得, 也可以采用CODEHOP方法获取同源基因, 甚至采用OVERLAP方法桥联获得双功能甚至多功能基因, 引物设计是采用专业软件如Primer、Oligo以及网络设计, 同时还要Vector NTI Advance等软件进行序列对比分析等, 设计好引物后通过互联网传输信息到生物技术公司, 如上海生工等进行引物合成, 获得引物后从植物材料总DNA中进行目的基因的扩增, 连接到载体, 并送样到生物技术公司测序验证目的基因, 之后转化到大肠杆菌或农杆菌中, 构建成植物表达载体。实验中要充分认识质粒功能和作用, 选择好不同类型功能的质粒, 是实验中基因重组酶切、连接、测试和表达等实验步骤中的重要环节。

2 目的基因的遗传转化

遗传转化要选择好受体植物材料, 同时开展前期的组织培养工作, 摸索再生体系过程中组织愈伤组织诱导、分化和生根等技术, 实验也可以采用种子中胚作为受体材料开展实验。在侵染之前还要对植物愈伤和分化组织进行抗生素试敏试验, 分析出抗生素浓度的临界浓度, 有效促进和筛选植株遗传转化。为了提高遗传转化效力还开展侵染菌种、菌液浓度和侵染时间等实验, 获取遗传转化的优化方案, 得到转基因植株, 并开展大规模繁殖, 服务于农业生产。

3 转基因植株的鉴定

由于实验工程复杂性, 目的基因遗传转化是否成功还须进一步的实验验证。通常采用的有Gfp或gus染色与显微观察法, 以及DNA、RNA、蛋白印迹杂交方法, 甚至是目的功能及其产物的酶活性或产物检测。显色方法采用染色剂和显微照相设备, 印迹方法除设计探针外还须特殊的杂交仪等, 目的基因表达酶活性或相关产物检测需要常规的植物生理生化方法和植物化学成分提取、分析方法, 实验设备要求常规实验仪器外, 还有必要气相色谱、液相色谱以及GC-MS等高端检测设备。

4 实验设备、设施要求

植物基因工程实验室所需常规设备有:计算机及互联网络、低温冰箱、PCR仪、离心机、超净工作台、电泳仪和电泳槽、移液器、凝胶成像系统、以及不同要求的试剂盒、药品、低质易耗管件、枪头等。另外还需配备人工气候植物培养室、植物组织培养室等。

植物基因工程毕竟是一门学科, 涉及的专有名词以及实验要求的很多俗语不能简要表述, 有的甚至不能本土化, 仍沿用国际化的英文表述, 要想深入了解和掌握, 仍需深入查阅相关前沿资料。

3.微生物实验室标准操作程序 篇三

一、生物实验教学情况总结

1. 探究实验：光对鼠妇生活的影响、种子萌发的环境条件、测定种子的发芽率、测定某种食物中的能量、比较不同蔬菜或水果中维生素C的含量、馒头在口腔中的变化、鱼鳍在游泳中的作用、检测不同环境中的细菌和真菌、花生果实大小的变异、酒精或烟草浸出液对水蚤心率的影响。

2. 学生实验：练习使用显微镜、观察植物细胞、观察人的口腔上皮细胞、观察人体的基本组织、观察草履虫、观察种子的结构、观察叶片的结构、绿叶在光下制造有机物、用显微镜观察人血的永久涂片、观察小鱼尾鳍内血液流动、饲养和观察蚯蚓。

3. 演示实验：植物对空气湿度的影响、观察家畜小肠的内部结构、种子萌发的过程中伴随着能量变化、种子萌发时放出了CO2气体、光合作用产生氧气、胆汁对食物的消化作用、模拟膈肌的运动、测定反应速度、测量胸围差、膝跳反射、发酵现象。

4. 课外兴趣小组探究：根的什么部位生长最快、空气流动对蒸腾作用的影响、叶片正、背面气孔是否一样多、采集和测算空气中的尘埃粒子、酸雨对生物的影响、废电池对生物的影响、扦插材料的处理。

从以上列举的实验数据（探究实验10个、学生实验12个、演示实验11个、课外兴趣小组探究实验7个）可以看出，我校初中生物实验开设率在90%左右。虽然我校的实验开设率还算比较高，但总结多年的实验教学经验初中生物教材在实验开设方面还存在以下问题：

①有些实验材料难以获取。例如：鼠妇、草履虫、天竺葵、水蚤、小鱼等。

②有些实验受季节影响效果不明显。例如：绿叶在光下制造有机物这个实验课程进度在冬天进行，受温度和光照的影响实验效果不明显。

③有些实验难以开展。例如：菜青虫的取食行为、动物的绕道取食、蚂蚁的通讯这几个实验受实验条件的限制难以开展。

二、具体做法

1. 尝试自己培养实验材料

《鼠妇的培养》这节课是初中生物的第一个探究实验，对学生探究方法的培养非常重要，但很多学校却因为找不到实验材料而没有做这个实验。鼠妇虽然在草丛中、花盆下经常可以看到他们的身影，但数量毕竟有限，每次实验起码需要数百只（按12个班计），如果去花盆或草丛中抓鼠妇，那既费力又不讨好。为了保证鼠妇的数量，我们尝试培养鼠妇。经过多次的试验，我们找到了一种获取大量鼠妇的方法。那就是找一个花圃，在里面放一些肥沃的土壤（不能是黄泥和沙子），提前一个月在花圃中埋几块花生麸，上面盖上枯叶或树枝，再抓少数鼠妇放进去繁殖，这样在花生麸周围就可以获取大量的鼠妇，每年只要在实验前添加一些花生麸就可以循环养殖，花圃还能种植其他植物，一举两得。

2. 找到可以替换的材料

“绿叶在光下制造有机物”这个实验用到的植物是天竺葵，天竺葵的耐寒性较差，往往难以多年种植，且植株叶片较少，若整个年级开展这个实验，起码需要几十棵天竺葵，这样每年都买新的成本较高，通过实验我发现天竺葵在12月份（该实验进度安排在12月）做实验效果并不理想。于是我通过多种实验材料的试验比较，发现凤仙花可以作为天竺葵的代替品，而且效果比天竺葵还明显，还有一个优点是凤仙花种子收集后可以每年不断播种，节省了不少成本。又例如鼠妇换成更容易买到的面包虫，“馒头在口腔中的变化”实验中的唾液换成可以买到的淀粉酶。

三、实验操作考试总结

我校初二的学生第二学期全部要参加实验操作考试，实验考试成绩占期末总成绩的10%。考试内容倾向于显微镜的操作，如观察洋葱内表皮细胞、观察人体空腔上皮细胞永久装片等。考试要点主要是看学生的操作是否规范、显微镜的使用是否熟练规范、对细胞结构的认识是否清晰等。考试形式：每个班分成四批，第一批16个学生先进考试室，其余学生在候考室等待，16个学生再分成4组分别由4位老师监考，学生独立操作，限时5分钟，在视野内用高倍镜找到对应的细胞并用指针指出来，举手示意老师检查，老师根据评分表细则给学生评分。通过几年的实践我们发现：实验操作考试是非常有必要的、效果也很好。由于考试成绩计入期末成绩，学生会比较重视，会提前复习实验操作或到实验室借用显微镜练习，这对巩固学生规范使用显微镜是有较大作用的，为高中的进一步学习打下了坚实的基础。

4.微生物实验室标准操作程序 篇四

I.目的：标本的质量是检验结果准确性与有效性的基础，为使标本的采集、管理受控，特制订本程序。

II.范围：适用于实验室的临床标本。III.规程：

1.职责：实验室现有工作人员须知本程序，相应工作岗位人员负责落实。2.工作程序：

2.1 标本接收：检验人员接收标本时首先应注意核对检验单：科别、姓名号、联号，发现错误需要更改时，应由原申请人员更改或征得同意后更改。2.2 标本的唯一性标识：确立样品的唯一性标识，要有每一位工作人员都明确的规定和标本，不可自作主张，以确保样本在分析前、分析中、分析后不同阶段不发生混淆。2.3 标本的采集、运送、保存见相应项目的临床标本收集程序。2.4 检查合格后在标本登记本上登记。2.5 所有标本均可能具有传染性，须严格遵守医院有关院内感染及医用垃圾的管理和处理规定，工作人员须注意保持并随时检查容器的完整和无标本外泄发生，并做好记录。

2.6 拒收标本的条件：标本管联号与申请单不一致；标本严重溶血或脂血；标本采集时间过长超过检测时间；样品变质。2.7 不能及时处理的标本，接受标本后，不能立即进行检测的标本，在规定时间内分离血清，冰箱保存。

2.8 检测前标本处理时，工作人员须仔细核对标本与标本资料记录的一致性，准确无误时，方可进行处理。

2.9 废弃样本经确认后均应视为有传染性，保持容器完整，置于废弃标本处，按有关规定消毒处理。

5-1-6实验室记录管理标准操作规程

I.目的：保证试验资料的原始性、真实性、可靠性，便于回顾。

II.范围：检验过程产生的数据资料，诸如病人信息资料、样本资料、检测数据、检验结果等。III.规程：

1.职责：检测人员对记录负责，室负责人对管理措施的落实和监督负责。2.工作程序

2.1 试验记录分为三个部分：

3.1.1 检测前的记录：病人信息资料、样本资料的书面记录。3.1.2 检测过程中的实验记录。3.1.3 检测结果的电子记录。3.2 记录方法：

3.2.1 接受标本记录：以书面形势记录病人信息、样本信息、是否保存，同时对样本做标识，记录人签名。

3.3 书面记录保存：

3.3.1 填写书面记录，字迹清晰。如有涂改，在涂改处应有涂改人签名，不得在记录本上进行无关书写，保持记录本清洁、完整。

3.3.2 检测过程中的实验记录：在专用实验记录簿上记载，不同实验区的记录簿不得混用。试剂贮存区应记录检测所用的试剂盒情况（名称、批号、数量）和自配试剂记录；标本制备区记录检测标本数及在本区内进行的技术操作过程。

3.3.3 实验记录须妥善保存，涉及医疗纠纷及特殊情况外，本室无义务提供给他人借阅或复印。

3.4 实验室工作人员在工作时，应按照实验室的各项规章制度和程序文件认真负责的完成工作。同时及时、完整填写各项实验室工作记录册，每项记录册由专人负责保管、存档，保存期2年。

3.4.1 《标本接收记录册》由工作人员在接收标本时按《标本接收程序》完成。

3.4.2 《标本贮存记录册》由工作人员在接收标本分类保存时按《标本贮存程序》完成记录。3.4.3 《试剂入库记录册》由室主任指定专人负责接收试剂，将试剂的批号、接收时间、数量的项目记录在册。

3.4.4 《试剂配置记录册》由各项实验的试剂配置人，在配置试剂时按记录册的要求填写。3.4.5 各项《仪器使用记录册》由操作人员在操作仪器后按记录册要求填写。

3.4.6 各项《仪器保养维修记录册》由操作人员在仪器维修和保养后按记录册要求填写。3.4.7 各区《温度、湿度记录册》由每天各区的工作人员在开始工作前完成。3.4.8 各区《冰箱温度记录册》由各区工作人员在开始工作前完成。

3.4.9 在《消毒液配置记录册》由室主任指定的专人定期即时配置消毒液后登记。4.4.10 《抱怨处理记录册》由处理抱怨的实验室负责人或实验室的质量负责人在处理抱怨时按《抱怨处理程序》登记。

4.4.11 《实验室日常管理记录册》由实验室主任指定专人在每天工作结束时，详细了解各项工作情况，并按记录册的要求登记。

4.4.12 《加样枪校准记录册》由实验室主任指定专人对加样枪校准后，详细记录。4.4.13 《污染物处理记录册》由实验室清洁人员在完成污染物处理后记录。4.4.14 《失控记录册》由实验室质量负责人在发生和解决失控时详细记录。

4.4.15 《室内质量控制记录册》由各项实验操作人员在完成实验时将实验数据详细记录。4.4.16 《标本拒收记录册》由工作人员在拒收标本时按《标本处理程序》完成。4.4.17 各区《清洁、消毒记录册》由各区工作人员在消毒后处理。

4.4.18 《标本处理记录册》由工作人员在处理标本时按《标本处理程序》完成。4.4.19 《标本上机记录册》由工作人员在上机扩增时完成。4.4.20 《标本检测结果记录册》由工作人员实验完毕后记录。

5.此标准操作变更程序：如果本操作程序使用者在实际工作中发现其存在问题，则应向科室负责人提出，科室负责人则召集所有与本程序有关的人员讨论，以决定是否需要变更本程序。

5-1-7实验室废弃物处理程序

I.目的：为保证检验质量，防止交叉感染，防止废弃物对实验室和社会环境造成污染，规范实验室废弃物的处理工作。II.范围：实验室的所有废弃物。III.规程： 1.程序：

实验室各区的废弃物分日常废弃物（如纸张）和生物污染废弃物（如吸头、离心管），分不同途径进行处理，日常废弃物应置于黑色垃圾袋内，按日常废弃物处置方法处置；有潜在传染性的样品及其他医用废弃品（如吸头、扩增完毕的反应管等）应视为生物污染物品，应置于盛有10％次氯酸钠的废物缸内，然后放入黄色垃圾袋内（并贴有明显的标识），统一交由本科的专人负责，由专职人员送医院垃圾站按医院规定统一处理，具体步骤如下： 1.1 每天实验前，在各区废物缸内均加入半缸10％次氯酸钠，实验中将吸头、子弹头丢入 废液缸中浸泡。

1.2 实验结束后将由10％次氯酸钠浸泡过的实验垃圾转入密闭垃圾袋中，由卫生人员（10％次氯酸钠浸泡后方可收集）送医院垃圾站统一处理，每天更换废液缸的10％次氯酸钠。1.3 临床标本（血清、血浆），手套、帽子、口罩、扩增后产物及一次性使用物品等实验材料，实验完毕后密封包装由卫生人员送医院垃圾站统一处理。扩增后的反应管严禁在实验室内打开。

1.4 检查操作台面和设备内是否有遗漏吸头，试管等。如有，捡起置于10％次氯酸钠溶液废液缸内，并立即用1％次氯酸钠对可能污染区域擦拭2～3遍，再用75％酒精擦拭1遍。1.5 实验区域的所有垃圾袋以黄色为标志，各区域垃圾在实验区缓冲间内封口，贴上生物标记，实验完毕后移出各实验区域，在公共走廊内移交卫生处理人员，并做好记录。

2.此标准操作变更程序：如果本操作程序使用者在实际工作中发现其存在问题，则应向科室负责人提出，科室负责人则召集所有与本程序有关的人员讨论，以决定是否需要变更本程序。

5-1-8实验室生物防护程序

I.目的：对各种危险因素采取有效的控制措施，预防实验室中存在的污染源对实验室、实验人员和环境的污染。

II.范围：适用于实验室全体工作人员。III.规程：

1.职责：实验室全体工作人员必须遵守生物防护措施，以确保实验室的安全运作。2.工作程序：

临床实验室工作人员应知晓在实验工作中存在的污染途径和防护措施。2.1感染途径：

2.1.1 直接接种：工作中偶然的针刺、破碎玻璃划伤直接引起传染。

2.1.2 皮肤、粘膜接触：临床标本中的感染源通过破损皮肤、粘膜接触造成感染。2.2 预防措施

2.2.1 来自所有病人的血液、体液等标本都认为是具有传染性，标本采集、运送过程中，应保持容器完好，无泄漏，完成检测后及时处理。

2.2.2 工作人员进入实验室必须穿工作服及工作鞋，都应戴上一次性口罩、帽子、手套，离开实验室要换下工作服及工作鞋。

2.2.3 实验过程中若有血清等生物污染物溅到皮肤上时，立即用肥皂、自来水彻底清洗干净。2.2.4 在实验过程中，病人标本或试剂不慎眼内应立即用生理盐水冲洗后，再用清水冲洗。标本接收区及制备区应备有生理盐水。

2.2.5 实验过程中再使用针具等锐器时，尽量小心防止受伤。若被锐器刺破时，应立即脱下手套，尽量挤压伤处，使血流出，然后用碘酒、75％酒精消毒，必要时进行预防补救措施。2.2.6 在实验过程中端正人标本（血液、体液）外漏或实验台面被血清等生物污染物污染后，应立即用10％次氯酸钠消毒，再用75％酒精擦净消毒。

2.2.7 实验完毕离开时，应脱下所有该实验区个人防护装备。离开实验室要洗手，洗手是最重要的自我保护措施。

3.实验室内禁止抽烟、吃东西。

4.实验室工作人员流动必须按照《人员流动程序》来进行。5.实验室清洁、消毒按照《实验室清洁程序》。

6.实验室生物污染物按照《实验室生物污染物处理程序》。

7.此措施变更程序：如果本措施在实际工作中发现其存在问题，则应向科室负责人提出，科室负责人则召集所有与本程序有关的人员讨论，以决定是否需要变更本程序。

5-1-9实验室应急处理程序 I.目的：为避免因仪器设备发生故障和试剂盒发生质量问题而影响到临床检测报告的及时性和准确性，特制定本程序。

II.范围：可能影响到检测报告发出的仪器设备和试剂等。III.规程：

1.职责：及时发现并报告仪器设备和试剂盒的异常情况是每一个工作人员的职责。

2.对于潜在着一定的可能影响检测质量的不确定因素，一旦发生，作为对应措施，实验室应有一套相应的应急处理程序，室负责人有责任组织并直接监督本程序的实施。3.工作程序：

3.1室负责人接到仪器设备故障的报警后，立即现场确认异常情况的性质和故障程度并及时排除。

3.2仪器设备故障本室不能解决的，应及时通知有关设备维修人员或供应商，具体程序见仪器设备管理程序，对于发生故障的仪器设备，及时维修的同时，采取以下处理办法。

3.2.1 有满足使用要求的替用设备的，启用替用设备。

3.2.2 可借用其他部门仪器设备时，核实该设备的使用状态良好后可借用。

3.2.3 替用、借用或备用设备的使用在满足质量要求的同时，必须同时满足实验室管理措施（特别是防污染）的要求。

3.3 试剂盒质量发生问题（如试剂变质等），经核实后，及时通知供货商更换另一批次试剂，或借同级医院同一厂家的试剂，使用前需先作质量检测，合格后方可使用。

3.4 仪器设备故障或试剂质量问题不能得到解决，预期将会影响到检测报告的及时发出，可将标本送至其他实验室检查如已影响到报告的及时发出，应向病人或相关病区公告，取得病人和医生的谅解。

3.5 影响到检测报告发出的情况，应在应急处理登记表作记录。

3.6 如遇到停电应急，实验仪应配备UPS断电保护措施以保存数据，同时立即通知医院尽快恢复供电。

3.7在实验过程中，病人标本或试剂不慎溅入眼内应立即用生理盐水冲洗，再用清水冲洗。

3.8此标准操作程序变更：如果本操作程序使用者在实际工作中发现其存在问题，则应向科室负责人提出，科室负责人则召集所有与本程序有关的人员讨论，以决定是否需要变更本程序。

4-13成人静脉穿刺标准操作规程

I.目的：建立成人静脉穿刺标准操作规程确保静脉穿刺操作的正确性和规范性。II.范围：适用于成人静脉穿刺。III.规程：

静脉穿刺是实验室试验获取血液样本的主要技术和方法。1.静脉穿刺前准备

a）准备好穿刺用托盘，内应包括所有采血用具（手套，止血带，注射器，针头等）b）确认受试者名单。

c）所有的样本收集管要贴上标签

d）确保受试者以舒服的姿势躺着或坐着，并使手臂的腹面向上。e）洗手

f）在受试者的穿刺位以上8～12厘米处紧紧的系上止血带，但不能太紧以免受试者不舒服。止血带的捆绑时间不应超过1～2分钟。

g）选择合适的血管：当轻压或轻拍时能感觉到其回弹的静脉即为合适的血管。最常用的选择部位是血管丰富并且血管贴近皮肤表层的肘前区域。

h）选择适用的穿刺方法。静脉穿刺通常有三种方法：真空管采血法，注射器法，头皮针法。i）收集所需的器具。

j）带上手套并注意常规防护。

k）用酒精棉球涂抹将要进行穿刺的部位，从中心以同心圆方式向外周涂抹，如果手臂不够干净者则需要重新擦拭。

l）穿刺部位晾干约30～60秒。m）在洁净后不要触摸穿刺部位。Z.静脉穿刺法

2.1真空采血法 真空采血管内具真空环境，当针及血管连接后，能将血液从静脉吸入采血管内。

a.刺穿某一已经选定的静脉。

b.使针与手臂成约15度角，迅速的使其方向与血管一致。c.针口斜面保持向上，迅速平稳的将针刺入血管。d.固定针头，使其不移动。

e.当第一支管采满后，换上附加的管。

f.如果没有血进入采血管内，则慢慢的退针，直至几乎离开皮肤。此时，重新确认血管的位置，并缓慢往血管方向送针。

g.如果再次穿刺不成功或者受试人觉到过分疼痛，则中止抽血而尝试改换穿刺部位。h.退针前先把真空管拔出。i.解开止血带。j.退针。

k.用纱布轻压抽血的部位，或要求受试人自行轻压3到5分钟。手臂需举至高于心脏水平位置以调控血流。

l.迅速把针放回专用容器。

m.在穿刺部位的纱布上贴上胶布。2.2注射器法

注射器是一个包括活塞和针筒的器具。当活塞往外抽时则产生吸力。当针插入血管后，产生的吸力能将血收入针筒内。a.穿刺某一已选定的静脉

b.试针与手臂成约15度角，迅速使其与血管方向一致。c.若观察到扣回倒血现象，指示针已经准确的刺入血管。d.固定针具确保针头不移动。

e.平缓的回抽注射器以抽取所需体积血液。f.解开止血带。

g.退针。待针头离开人体后，轻轻的把注射器往上拉动，防止血液从针头滴下。

h.用纱布轻压抽血部位，或要求受试者自行轻压3～5分钟，手臂需举至高于心脏水平位置以控制血流。

i.将血液样本完全转移到指定的管内。j.迅速把针放入利器专用容器

k.在穿刺部位的纱布上贴上胶布。2.3头皮针法

头皮针法是一种从小血管采血，或为婴儿和幼儿采血的常用方法。用头皮针采血最方便的部位是手部静脉。a.在手背选择最大的合适静脉。b.用食指与拇指固定该血管

c.一起挤压食指与拇指之间形似蝴蝶状的静脉两翼，使其倾斜，以便能使针处于合理的位置。d.使针与手臂成约10～15度角，迅速使其与血管方向一致。e.平稳迅速的刺针

f.若观察到回血现象，指示针已经准确的刺入血管，轻轻的往前推针，使针刺入血管内更深的部位。

g.固定针头，如有必要，用一手抽针，一手固定针筒。h.当抽取足够的样本后，解开止血带

i.退针。待针头离开人体后，轻轻的把注射器往上拉动，防止血液从针头滴下。j.用纱布轻压抽血部位，或要求受试者自行轻压3～5分钟，手臂需举至高于心脏水平位置以控制血流。

k.将血液样本完全转移到指定的管内。l.迅速把针放入利器专用容器

5.微生物实验室标准操作程序 篇五

1、目的：

保证血液标本信息的正确性，血液标本的标签与申请单内容的一致性。

2、适用范围：

所有送往配发血室的血液标本。

3、适用对象及要求：

3.1所有本室从事本工作的工作人员均应熟知并遵守本SOP。3.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

4、程序：

4.1由临床支持中心送来的血液标本，必须要有专人负责接收，履行严格地交接手续。

4.2收取血标本时，要与临床支持中心送标本者共同核对申请单、血液标本与瑞美检验系统里患者姓名、年龄、性别、病区、床号、住院号、ID号，血型等信息是否一致。

4.3接收血液标本须检查有无漏、损、缺号，未贴条形码，血液标本条形码信息与申请单信息是否一致。

4.4检查血液标本量是否充足，有无溶血、乳糜，确定血标本是否符合质量要求，核对无误方可在瑞美检验系统中进行签收。

4.5在瑞美检验系统中查询患者信息，了解以往血型、不规则抗体筛查等项目检查情况。

4.6将所有血液标本离心备用，并进行血型复检、不规则抗体筛查。4.7不同申请内容、不同日期的血液标本用后应分别放置。4.8血液标本配血有效期为3天，如一旦用于了配血，则有效期缩短为1天。

6.微生物实验室标准操作程序 篇六

一、洗刷.消毒规范及标准

1、餐具、酒具的洗刷消毒要求是：一洗，二刷，三冲，四消毒，五封闭（保洁），保证餐具无油腻、无污渍、无水迹、无细菌。

2、洗刷：

2.1将餐具、酒具先倒掉残渣，分类放置、分开洗刷；

2.2用清水冲洗餐具、酒具，酒具在冷水中浸泡5分钟，去酒味； 2.3用热碱水或加洗洁精的水刷洗餐具，以去油腻；酒具在加洗洁精的水中刷洗；要用专用的洗碗布洗刷。2.4将用洗洁精洗涤后的餐具、酒具再用清水冲洗一遍，然后分类放置。

3、消毒：洗净的餐具进行消毒，可用以下几种方法：

3.1煮沸消毒法。将餐具放在网篮中，在水中煮沸20—30分钟； 3.2蒸汽消毒法。将洗净的餐具放入消毒柜中（立着放），关严门后开放蒸汽，当温度升到1200C，在12磅压力下蒸20分钟即可；

3.3高锰酸钾溶液消毒法。将洗净的餐具放入1/1000浓度的高锰酸钾溶液中浸泡10分钟即可；

3.4漂白粉消毒法。用5克漂白粉加1千克温水充分搅拌成1/2000的溶液，将洗净的餐具放入溶液中浸泡5—10分钟，便达到消毒的目的；

3.5红外线消毒法。消毒时，要求箱内温度达到120℃，并持续30分钟； 3.6“84”消毒液消毒法。使用时，将洗净后的餐具放入按1：200配制好的药液中浸泡5分钟，再用清水冲洗干净即可；

3.7根据不同的餐具、酒具、用具，可选择不同的方法： 3.7.1大件餐具用蒸汽消毒法；

3.7.2小件餐具用红外线消毒法和“84”消毒液消毒法；

3.7.3酒具用“84”消毒液消毒法。用清水冲洗后还应用消毒布擦干、擦亮； 3.7.4小毛巾用漂白粉消毒法和红外线消毒法； 3.7.5口布、台布用漂白粉消毒法。

4、保洁：消毒后的餐具应放在保洁橱内，以防止细菌污染

二.餐厅卫生标准及规范

☆卫生区域清扫标准及操作要求涉及项目

1、负责人 清扫区域 卫生标准 操作要求 注意事项 1.2迎宾员 大门 玻璃光亮清洁，无灰尘、无油污、无手迹 用干净布蘸酒（散酒）

从上到下，从里到外打扫

1.3地面台阶、踏毯、沙发、茶几 无杂物、无污渍、无水迹；沙发表面清洁，皮革光亮，茶几无水迹、无污迹 用干净的拖把（半湿）从里到外拖净；沙发用“皮革光亮剂”擦拭，茶几用干净抹布从上到下抹拭。

1.4吧台人员 订餐台 话机无灰尘、无油渍、消毒。烟缸无破损、无水迹、无污

江南花园酒店餐饮部工作程序--VivianGuan ____________________________________________________________________________________________ 渍，表格摆放整齐 话机用干净抹布蘸酒精消毒擦拭，烟缸用干抹布擦净

1.5椅子 摆放整齐、无灰尘、无污渍 用半湿的干净抹布擦拭。

1.6吧台酒水展示柜酒水橱 玻璃明亮无灰尘、无水迹、无污迹、酒水外表清洁，商标向外，分类摆放整齐 用干净的半湿抹布从上到下，从里到外打扫。1.7吧台台面、地面 无灰尘、无污渍、无油迹、无水迹、无油污、无杂物 用干净的半湿抹布自上而下，从左至右打扫。

1.8点菜员 展台里外 无灰尘、无污渍、灯光设备完好，菜盘摆放整齐，价码牌无油迹，并摆放正确 用干净的半湿抹布擦拭。

1.9地面 无水迹、无油污、无杂物 用干净的半湿抹布擦拭。

1.10、传菜员 托盘 无油迹、无污渍、用干净垫布垫盘，并统一放在指定位置 先用餐洗净液刷净，再用清水冲一遍，最后用干净干抹布擦拭。

1.11洗碗间、墙面、地面、楼梯、走廊 物品摆放整齐，无灰尘、无油污、无杂物 用干净的半湿抹布擦，用半湿的干净拖把拖地面。

1.12拖把、扫帚 无异味、统一位置挂放 用餐洗净水浸泡拖把，再用清水刷净。1.13宴会厅服务员 摆台物品 数量齐全、无破损、无污渍、无水迹、无杂物、符合摆台规范 用干净的消毒抹布按从台布、转芯、转盘、吃盘、勺筷、杯具、口布、茶具、香巾托、烟缸、宾客意见卡、椅子的顺序打扫。

1.14灯、空调、OK机、饮水机、暖瓶 无污渍、无水迹、无灰尘，空调过滤网无灰尘能正常使用 灯、空调、OK机、饮水机、暖瓶，用干抹布擦拭，清洁吊灯可站在人字梯上用鸡毛掸拂拭灰尘，清洁周期为一个月，空调过滤网每周取下用清水冲洗后，凉干。关闭电源方可打扫。

1.15接手桌 桌面无污渍、无灰尘、无水迹桌内各用品清单备存，店标统一向外，分类摆放，无水迹、无污渍、无破损 用干净的抹布从上到下，从里到外打扫。

1.16门、窗、墙面、地面、挂画、衣架、沙发 无油渍、无灰尘、无破裂、沙发皮革光亮。门、窗、墙、挂画、衣架、沙发，按从上到下，从左到右顺序用抹布擦拭，地面用半湿拖把擦拭，沙发用皮革亮剂擦拭。

1.17零点服务员 摆台物品 要求同宴会的摆台物品卫生标准 按零点摆台顺序打扫,用干净的抹布。

1.18灯、空调无油渍、无灰尘、无水迹,能正常使用,过滤网无灰尘同宴会厅关闭电源方可打扫。

2、个人卫生标准

2.1做到四勤：勤洗手、洗澡；勤理发、修面；勤换洗衣服；勤修剪指甲； 2.2工作前后要洗手；

2.3要有健康意识，定期进行体格检查（酒店统一进行）。

3、环境卫生标准

3.1地面清洁无杂物，桌椅保持洁净无浮尘，门窗要经常擦洗无油渍，餐厅内四壁无尘，顶壁无蜘蛛网，保持清净舒适的就餐环境； 3.2随时清除垃圾、杂物，垃圾桶要加盖，垃圾要一餐一清，一日一清；餐厅内

江南花园酒店餐饮部工作程序--VivianGuan ____________________________________________________________________________________________ 不要摆放杂物、空酒瓶及私人用品，扫帚、拖把、畚箕等清洁用具要放在工作间，切忌放在过道中或客用洗手间；

3.3洗手间要勤冲洗、勤打扫，做到空气清新、无异味、清洁明亮；

3.4餐厅、通道、工作区域要采取有效措施，消灭苍蝇、老鼠和蟑螂等害虫。

4、操作卫生标准

4.1服务员使用的抹布、垫布每天要洗干净，用开水浸烫，以减少或杀灭细菌，托盘等工具要保持清洁；

4.2工作时，避免触摸头发或面孔，不许对着食品、宾客咳嗽、打喷嚏；不准随地吐痰，不准吸烟；不要在宾客面前掏耳、剔牙、打哈欠、抠鼻子；

4.3手指不可接触到食物，亦不可碰触杯口、刀尖、筷子前端及汤匙的入口端； 4.4凡腐烂变质和不符合卫生要求的食品坚决不出售；

4.5对不干净的餐具和台布、口布等要及时送去清洗，不可摆用； 4.6不准随地丢弃废纸、倒水、乱放茶杯、餐具等；

4.7在服务过程中要留心就餐宾客，发现病患者，对其使用的餐具要单独收拾、重点消毒。

5、餐、酒具卫生标准

5.1餐具、酒具要严格依照洗刷、消毒的程序进行，一洗、二刷、三冲、四消毒、五封闭；

5.2餐具应无油腻感、无污渍、无水迹，盘面无手印； 5.3酒具应擦亮，无污迹、无水迹，杯体无手印。

6、其它卫生标准

6.1小毛巾、口布，清洗干净无异味；

6.2工作台内物品摆放竟然有序，内外擦拭干净无浮尘； 6.3餐厅电器无浮尘、无油迹；

6.4餐厅卫生做到整洁、舒适，要经常开窗流通空气，餐厅无异味、无死角。

一.餐厅部交接班制度标准

1.餐厅接班人员必须10分钟到岗，交班人员在接班人员未到时，或未完成接班检查工作前不得擅自离去。

2.交班人员应对本班工作及上一班留下工作进行情况，需交接的事宜都要有详细文字记录，并口头交代清楚。

3.接班人员认真核对交接班记录，了解上一班工作情况和本班注意事项，确认后在交接记录上签名，并立即着手处理有关事宜。

3.1交接记录应列明下列事项：人员交接、物品交接、交接班记录； 3.2客人的预定；

3.3重要客人的情况； 3.4客人的投诉；

3.5未办完的准备工作； 3.6客人的特别要求； 3.7餐厅工作的变化情况；

江南花园酒店餐饮部工作程序--VivianGuan ____________________________________________________________________________________________ 3.8经理（主管）交办的其它工作。

4、餐厅结束营业后，当班人员应做好摆台工作和卫生清理工作，使全面器具完整、卫生；餐厅内无酒瓶、垃圾等物品，所有物品摆放有序；关闭所有电器开关，检查有无安全隐患，之后与值班保安人员进行交接，做好交接记录，餐厅人员离岗。

5、午餐临近结束时，值班经理应来到订餐员处，与相关人员做好工作交接，之后进入值班状态；期间应做好后期服务监督，有客人不满或投诉时及时处理，如有不能解决的问题应及时上报；做好电话订餐记录工作和客人离店后提醒服务员关闭电源，值班结束时与接班人员做好交接。

三.餐厅一日工作规范

1、一日工作时序

1.1AM9:20集合点名，召开班会，布置卫生清理工作；

1.2AM9:40前完成早操或文娱活动，之后开始卫生清理、物品领用； 1.3AM10:30前完成卫生清理工作，管理人员开始卫生、设备检查； 1.4AM11:00召开班前会，传达当日工作重点和《菜品营销单》，检查员工上岗前仪表仪容；

1.5AM11:10值班人员站位迎宾，同时开启电器设备，其他人员参加培训； 1.6AM11:30全体人员上岗站位，开始午餐对客服务及现场管理工作； 1.7PM2:00客人走后做好卫生清理，留好值班人员，做好收尾工作； 1.8PM4:30集合点名，开班会；

1.9PM4:45开始清理卫生，检查设备，之后管理人员进行检查； 1.10PM5:10上岗站位，开启相关电器设备，准备迎宾； 1.11PM5:40开始晚餐对客服务及现场管理；

1.12PM9:00对未离店客人做好后续服务，完成部分卫生清理工作，至关闭餐厅与保安交接；

1.13餐厅经理（主管）每周应召开两次部门大班会，一次部门管理人员会及定期参加酒店各种例会；

1.14以上作业时序及工作安排可随季节和特殊情况适当调整。

2、注意事项

2.1各岗位服务员要总结当餐工作情况，做好工作日记 ；

2.2在接受检查和填写完工作记录后方可下班或与下一班交班；

2.3领班要填写《领班汇报单》，交主管；

2.4吧台要完成当天的营业日报表和客户档案储存工作；

2.5主管要检查当天的营业日报表及一天内出现的问题（以备布置工作，开好班前会）；

7.微生物实验室标准操作程序 篇七

1 实验室生物安全管理的重要性

科技的发展为高等院校提供了更加先进的资源, 也推动着高等院校不断地向培养创新型人才的方向发展, 理论结合实际不仅仅是一句空话, 更是现今社会发展的一个重要前提, 高等院校的发展也需要培养高素质的实践型人才, 这就需要高等院校为学生提供可以进行安全实践操作的课堂, 从而能过培养学生的动手能力, 激发学生的兴趣, 提升其创新意识①。只有开展优质教学, 才会使学生的素质增加。

2 实验室生物安全管理存在的问题

目前在实验室的建设也成为高等院校建设的主要内容之一, 然而其生物安全管理方面还存在着许多不足, 这些安全问题若不得到及时纠正, 将会产生严重的危害。其主要问题有以下几点:

2. 1 缺乏行之有效的科学管理体系

成立一个实验室的流程是十分简单的, 许多高等院校建设实验室的速度往往十分之快, 且数量也较多, 这就给管理造成不小的难度, 尤其是一些高等院校只顾建设, 对于后期的管理却十分松懈, 因而使实验室的管理缺乏体系, 实验室的工作人员责任心不强, 管理意识跟不上, 或者实验室的管理只是流于形式②, 并没有真正落到实处。主要的表现就是使用实验室的人员往往数量众多, 因而一些管理人员便疏于记录, 从而一旦发生事故时找不到事故发生的原因, 给学校和人员造成重大损失。

2. 2 没有充分的环境保护和自我保护意识

实验室里主要存放的就是一些设施和化学物品, 其中一些物品具有十分大的危害性, 这些物品若是得不到妥善的安置, 或者在用后没有进行及时的处理, 就会对环境造成危害, 甚至会对人身体造成伤害。然而实际操作中一些操作人员由于麻木疏乎, 对环境保护的重要性认识得不够充分, 从而使这些化学物品被随意乱丢乱放, 在进行实验操作后又没有进行妥善处理, 从而出现对环境和操作人员造成危害的现象时有发生。

3 实验室生物安全问题的对策研究

针对实验室管理出现的安全漏洞以及管理问题, 需要对实验室进行规范化管理和操作, 其安全问题的对策主要从以下两个方面入手:

3. 1 完善安全管理体系

建立一套行之有效的管理体系可以避免安全事故的发生, 具体措施为:

第一, 严格制定实验室使用制度, 每个使用实验室的人员都要严格遵守制度, 不得违背制度的规定, 如果出现违反规定的情况可进行一定的惩罚措施。

第二, 对于实验室的负责人要实施严格的问责制, 使其对实验室的安全管理自发形成一种责任感, 这样才会使实验室的安全管理真正得以实现。

第三, 对实验室的使用人员实施登记制度, 要将使用的详细情况加以登记。

第四, 对于实验室的设备进行有效管理, 实验室的设备属于公共财产, 因而许多人在使用时并没有保护公共财产的意识, 这就需要将每台设备都要配备专门的人员进行管理, 并将设备管理人员的名字贴在设备上, 这样就会使设备的管理者重视设备的维护。同时对于设备的防护也要有一套行之有效的应急措施, 在发生意外的时候可以有条不紊地进行处理。

通过规范化管理, 使人人做到自觉遵守实验室使用制度, 提高安全意识, 从而达到实验室生物安全管理规范化操作的目的。

3. 2 加强安全意识教育

第一, 对于使用实验室的人员, 尤其是学生, 要进行安全意识教育, 将安全意识渗入到平时的教育中去, 在进行实践操作的时候可以通过讲解事故案例使学生对于安全的重要性有更加具体的体会, 同时定期就安全使用实验室方面进行抽查, 以使学生重视实验室的安全原则。

第二, 加强学生对实验操作的规范性, 教师需要适时引导和指正学生在进行操作时出现的不当行为, 如物品随意丢置, 操作程序不达标等。针对一些学生对于安全操作的意识不高的情况, 可以进行操作考核, 将成绩列为学生的总学分当中, 这样可以提升学生对操作规范的重视性, 从而达到规范实验操作的目的。

4 结束语

实验室生物安全的重要性不容忽视, 它是保障实验正常有序进行和实验人员自身安全的重要前提, 只有保证实验室的管理体体系化, 操作人员的操作规范化, 安全意识自觉化, 这样才能够保证实验室的生物安全。

摘要：随着我国高校规模的不断壮大, 各个医学高校本着以科学发展观为基础, 以可持续发展为目的, 将复合性高素质的医学人才的教育培养作为重点, 以理论为依托, 将实践引入教学体系中, 因而引入了高新的医学实验设备, 从而为建设现代化实验室打下基础。实验是进行医学研究和实践必不可少的环节, 因而实验室也是进行医学教育的重要场所, 然而如今众多的实验室管理所引发的一些不良问题, 却不得不值得注意。本文就实验室生物安全规范化操作和安全管理进行深入探讨, 对产生问题和对策进行分析, 进而为实现科学管理实验室提供理论依据。

关键词：实验室,生物安全管理,规范化操作

参考文献

[1]陈省平, 蓝秀健, 彭毅.实验室生物安全管理体系的文件化[J].实验室研究与探索, 2014 (06) .

[2]李嫄渊, 吴淑燕, 黄瑞.病原微生物学研究生实验室的生物安全管理[J].实验室科学, 2013 (06) .

8.微生物实验室标准操作程序 篇八

[关键词]初中生物 实验教学 操作能力 培养

[中图分类号] G633.91[文献标识码] A[文章编号] 16746058（2016）140123

新课程改革要求教师改变以往的教学理念，在传授给学生知识的同时，注重培养他们的学习能力。具体到初中生物教学中，教师既要让学生学习和掌握新知识，也要让他们通过动手、动脑来收集和处理信息，提高学生的探究和操作能力。生物作为一门以实验为主的学科，自然要通过实验教学来培养学生的动手操作能力。笔者在长期的教学实践中，对培养学生的实验操作能力有一些体会，现表述如下，希望能够起到抛砖引玉之效，使更多的同仁参与到这一课题的研究中，促进学生综合能力的提高。

一、鼓励学生大胆动手

以往的初中生物实验教学中，基本上都是由教师按照课本中的实验来准备实验材料、实验器材等，在课堂上，学生只要按照教师教给的步骤，按部就班地操作就可以了，这就导致参与实验的学生成了机械的操作者，而其他学生则成为看客，提不起动手操作的兴趣，还有的学生因为胆子较小，不敢动手。最后，虽然实验教学花费了很多时间，可是学生对实验过程和结果没有深刻的印象，教学效果也不理想。在这样的生物实验教学中，教师只是为了实验而实验，忽视了学生的主体性，也忽视了学生基本的实验技能和生物科学素养的培养；没有给学生创设思考和探究的机会，抑制了学生思维的发展。而要培养学生的实验操作能力，教师要转变以往的实验教学模式，树立以学生为主的教学观念，由教师讲实验、演示实验，变为由学生设计实验、动手做实验，使他们在完成实验的过程中掌握基本操作技能，弄清实验原理，在提高实际操作能力的同时，真正学有所得。例如，在进行《探究种子萌发的外界条件》这个实验时，笔者让学生分组去完成，从提出假设、设计方案、开展实验到分析结果、写实验报告等都由学生完成。学生们表现非常积极，他们通过观察生活、查找资料、设计实验方案、记录实验过程和结果等总结出了种子萌发的外界条件。这样，学生不仅获取了知识，还掌握了实验方法和步骤，提高了动手操作能力。

二、帮助学生养成规范操作的习惯

在生物实验教学中，不少学生存在着操作不规范的问题，一方面是因为他们刚接触实验，有的操作还没有掌握要领，另一方面是因为学生对基本操作不够重视，不按规定和要求去操作。为了避免和解决这个问题，生物教师要帮助学生养成良好的实验操作习惯。首先，教师要做好操作示范，学生的实验操作很多是在模仿教师的操作中获得的，所以我们要加强教师课堂演示实验的示范性，通过正确、熟练、灵巧、科学的操作帮助学生形成规范操作的意识和态度。例如，在使用显微镜时，应坚持使用左眼看目镜，这样便于绘制图形。其次，加强基本操作训练，让学生养成规范的实验操作习惯，不是一两节实验课就能达到的，而是学生在长期的训练中逐渐养成的。因此，在初中生物教学中，教师应将基本的实验操作训练贯穿于教学的全过程，每次实验课前，教师要讲清操作要求和注意事项；在实验过程中，要加强对学生的检查和指导，及时纠正学生不规范的操作；实验后，教师要及时归纳学生实验过程中出现的问题，让学生在总结和反思中加深认知，逐渐养成良好的操作习惯。

三、积极开展课外实验活动

课外活动是课堂教学的补充与延续，是学生把课堂所学知识转化为能力的重要途径。为此，教师应积极开展课外实验活动，让学生走出校园，走进自然，走进社会，使学生能够将理论知识与生产生活实践相结合，在实践中提高实验操作能力。因为课外实验是在课堂外开展的，所以不管是实验方案的制订、实验器材的选用，还是对实验现象的观察与记录以及实验结果的分析、整理等，都是学生独立或合作完成的，教师不参与学生的实验过程，即便学生在实验中遇到了问题也是让他们自己解决。因此，与课堂实验相比，课外实验活动更能够体现和发挥学生的主体性，更能够培养他们的实验操作能力以及理论联系实际的能力。例如，开展“向日葵人工辅助授粉”“植物营养繁殖的操作”等课外实验，学生不仅验证和掌握了课本中的理论知识，还学会了人工授粉、扦插、压条和嫁接等实用技术，同时增强了他们理论联系实际的意识和能力。

总而言之，生物教学离不开实验，也不能脱离实验，开展实验教学不仅是生物学科的需要，也是符合素质教育要求的，我们要充分利用生物实验将生物知识更直观、更形象、更生动地展现出来。在初中生物教学中，教师要对实验教学有足够的重视，引起学生对实验学习的重视，进而使他们通过亲自动手操作，掌握实验步骤和要领，加深对知识的理解，并在独立思考和探究的过程中发挥潜能，提高实验操作能力以及分析和解决问题的能力。

9.微生物实验室标准操作程序 篇九

食品微生物实验室工作人员，必须有严格的无菌观念，许多试验要求在无菌条件下进行，主要原因：一是防止试验操作中人为污染样品，二是保证工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染。

一、无菌操作要求

1.接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。

2.进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。

3.接种食品样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75％酒精棉球将手擦干净。

4.进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。

5.从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。

6.接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。

7.接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。

8.吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。

二、无菌间使用要求

1.无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门，另设有0.5-0.7m2的小窗，以备进入无菌间后传递物品。

2.无菌间内应保持清洁，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。

3.无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W紫外灯，距离在1.0m处，照射时间不少于30min，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。

4.处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。

5.在无菌间内如需要安装空调时，则应有过滤装置

三、消毒灭菌要求

微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。

（一）干热和湿热高压蒸气锅灭菌方法

1．灭菌前准备

（1）所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密，如用金属筒应将上面通气孔打开。

（2）装培养基的三角瓶塞，用纸包好，试管盖好盖，注射器须将管芯抽出，用纱布包好。

2．装放

（1）干热灭菌器：装放物品不可过挤，且不能接触箱的四壁。

（2）大型高压蒸气锅：放置灭菌物品分别包扎好，直接放入消毒筒内，物品之间不能过挤。

3．设备检查

（1）检查门的开关是否灵活，橡皮圈有无损坏，是否平整。

（2）检查压力表蒸气排尽时是否停留在零位，关好门和盖，通蒸气或加热后，观察是否漏气，压力表与温度计所标示的状况是否吻合，管道有无堵塞。

（3）对有自动电子程序控制装置的灭菌器，使用前应检查规定的程序，是否符合于进行灭菌处理的要求。

4．灭菌处理

(1)干热灭菌法：此法适应于在干热情况下，不损坏、不变质、不蒸发的物品、较常用于玻璃器皿、金属制品、陶瓷制品等的灭菌。

① 器械器皿应清洗后再干烤，以防附着在表面的污物炭化。

②灭菌时安放物品不能过挤，不要直接接触底和箱壁，物品之间留有空隙。

③菌时将箱门关紧，接上电源，先将排气孔打开约30min，排除灭菌器中的冷空气，温度升至160℃调节指示灯，维持1.5 –2h。

④ 灭菌完毕后或温度升温过程中，须在60℃以下才能打开箱门。

(2)手提式高压锅或立式压力蒸气灭菌器的使用应按下列步骤进行：

①手提式高压锅在主体内加入3L清水，立式高压锅加水16L（重复使用时应将水量补足，水变混浊需更换）.②手提式压力锅将顶盖上的排气管插入消毒桶内壁的方管中（无软管或软管锈蚀破裂的灭菌器不得使用）。

③盖好顶盖拧紧，勿使漏气；置灭菌器于火源上加热，立式压力锅通上电源，并打开顶盖上的排气阀放了冷气（水沸腾后排气10-15min）。

④关闭排气阀，使蒸气压上升到规定要求，并维持规定时间（按灭菌物品性质与有关情况而定）。

⑤达到规定时间后，对需干燥的物品，立即打开排气阀排出蒸气，待压力恢复到零时，自然冷却至60℃后开盖取物，如为液体物品，不要打开排气阀，而应立即将锅去除热源，待自然冷却，压力恢复至零，温度降到60℃以下再开盖取物，以防突然减压液体剧烈沸腾或容器爆破。

(3)卧式压力锅蒸气灭菌器的使用按下列步骤进行：

① 关紧锅门，打开进气阀，将蒸气引入夹层进行预热，夹层内冷空气经阻气器自动排出。

②夹层达到预定温度后，打开锅室进气阀，将蒸气引入锅室，锅室内冷空气经锅室阻气器自动排出。

③ 待锅室达到规定的压力与温度时，调节进气阀，使保持恒定至

④自然或人工降温至60℃再开门取物，不得使用快速排出蒸气法，以防突然降压，液体剧烈沸腾或容器爆破。

⑤使用自动程序控制式压力蒸气灭菌器，在放好物品关紧门后，应根据物品类别按动相应开关，以便按要求程序自动进行灭菌，灭菌时必须利用附设仪表记录温度与时间以备查，操作要求应严格按照厂家说明书进行。

5．灭菌温度与时间(1)干热灭菌器灭菌温度160℃，1.5-2h。(2)压力蒸气灭菌锅灭菌温度与时间

（二）间歇灭菌方法

1.灭菌方法系利用不加压力的蒸气灭菌，某些物质经高压蒸气灭菌容易破坏，可用此法灭菌。

（1）将欲灭菌物品置于锅内，盖上顶盖，打开排水口，使器内余水排尽。

（2）关闭排水口，打开进气门，根据需要消毒10～20min。

（3）灭菌完毕关闭进气门，取出物品待冷至室温温度，放入37℃温箱过夜，次日仍按上述方法消毒，如此三次，即可达到灭菌目的。

2．血清凝固器使用方法，培养基中含有血清或鸡蛋特殊成份时，因高热会破坏其营养成份，故用低温，可使血清凝固，又可达到灭菌目的。

(1)在使用该法灭菌的血清等分装时，需严格遵守无菌操作，试管、平皿也经灭菌后使用。

(2)将培养基按要求使成斜面或高层，加足水后，接上电源，升温75～90℃1h灭菌，放37℃温箱过夜，再如此灭菌三次。

3．煮沸消毒：可用煮锅或煮沸消毒器，水沸腾后再煮5～15 min，也可在水中加入2﹪石炭酸煮沸5min，加入0.02﹪甲醛, 80℃煮60 min均可达到灭菌目的, 但选用煮沸消毒的增消剂时, 应注意对物品的腐蚀性.4．灭菌处理:灭菌后物品,按正常情况已属无菌,从灭菌器中取出应仔细检查放置,以免再度污染。

(1)物品取出,随即检查包装的完整性,若有破坏或棉塞脱掉,不可作为无菌物品使用。

(2)取出的物品,如为包装有明显的水浸者,不可作为无菌物品使用。

(3)培养基或试剂等,应检查是否符合达到灭菌后的色泽或状态,未达到者应废弃。

(4)启闭式容器,在取出时应将筛孔关闭。

(5)取出的物品掉落在地或误放不洁这处,或沾有水液,均视为受到污染,不可作为无菌物品使用。

(6)取出的合格灭菌物品,应存放于贮藏室或防尘柜内,严禁与未灭菌物品混放。

(7)凡属合格物品,应标有灭菌日期及有效期限。

(8)每批灭菌处理完成后,记录灭菌品名、数量、温度、时间、操作者。

四、有毒有菌污物处理要求

微生物实验所用实验器材、培养物等未经消毒处理，一律不得带出实验室。

1.经培养的污染材料及废弃物应放在严密的容器或铁丝筐内，并集中存放在指定地点，待统一进行高压灭菌。

2.经微生物污染的培养物，必须经121℃30min高压灭菌。

3.染菌后的吸管，使用后放入5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中，最少浸泡24h（消毒液体不得低于浸泡的高度）再经121℃30min高压灭菌。

4.涂片染色冲洗片的液体，一般可直接冲入下水道，烈性菌的冲洗液必须冲在烧杯中，经高压灭菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入5﹪煤酚皂溶液中浸泡24h后，煮沸洗涤。做凝集试验用的玻片或平皿，必须高压灭菌后洗涤。

5.打碎的培养物，立即用5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液喷洒和浸泡被污染部位，浸泡半小时后再擦拭干净。

污染的工作服或进行烈性试验所穿的工作服、帽、口罩等，应放入专用消毒袋内，经高压灭菌后方能洗涤。

五、培养基制备要求

培养基制备的质量将直接影响微生物生长。因为各种微生物对其营养要求不完全相同，培养目的的不同，各种培养基制备要求如下：

1．根据培养基配方的成分按量称取，然后溶于蒸馏水中，在使用前对应用的试剂药品应进行质量检验。

2．PH测定及调节：PH测定要在培养基冷至室温时进行，因在热或冷的情况下，其PH有一定差异，当测定好时，按计算量加入碱或酸混匀后，应再测试一次。培养基PH值一定要准确，否则会影响微生物的生长或影响结果的观察。但需注意因高压灭菌可影响一些培养基的PH降低或升高，故不宜灭菌压力过高或次数太多，以免影响培养基的质量，指示剂、去氧胆酸钠、琼脂等一般在调完PH后再加入。

3．培养基需保持澄清，便于观察细菌的生长情况，培养基加热煮沸后，可用脱脂棉花或绒布过滤，以除去沉淀物，必要时可用鸡蛋白澄清处理，所用琼脂条要预先洗净晾干后使用，避免因琼脂含杂质而影响透明度。

4．盛装培养基不宜用铁、铜等容器，使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。

5．培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的，又要注意不因加热而降低其营养价值，一般121℃15min即可，如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等，则应采用低温灭菌或间歇法灭菌，一些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、抗菌素等，待基础琼脂高压灭菌后凉至50℃左右再加入。

6．每批培养基制备好后，应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。如果是生化培养基，使用标准菌株接种培养，观察生化反应结果，应呈正常反应，培养基不应贮存过久，必要时可置4℃冰箱存放。

7．目前各种干燥培养基较多，每批需用标准菌株进行生长试验或生化反应观察，各种培养基用相应菌株生长试验良好后方可应用，新购进的或存放过久的干燥培养基，在配制时也应测PH，使用时需根据产品说明书用量和方法进行。

8．每批制备的培养基所用化学试剂、灭菌情况及菌株生长试验结果、制作人员等应做好记录，以备查询。

六、样品采集及处理要求

1．所采集的检验样品一定要具有代表性，采样时应首先对该批食品原料、加工、运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查，检查是否有污染源存在。

2．根据食品的种类及数量，采样数量及方法应按标准检验方法的要求进行。

3．采样应注意无菌操作，容器必须灭菌，避免环境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新洁尔灭、酒精等消毒药物灭菌，更不能含有此类消毒药物或抗生素类药物，以避免杀死样品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需灭菌方可应用。

4．样品采集后应立即送往检验室进行检验，送检过程中一般不超过3h，如路程较远，可保存在1～5℃环境中，如需冷冻者，则在冻存状态下送检。

5．检验室收到样品后，进行登记（样品名称、送检单位、数量、日期、编号等），观察样品的外观，如果发现有下列情况之一者，可拒绝检验。

(1)样品经过特殊高压、煮沸或其他方法杀菌者，失去代表原食品检验意义者。

(2)瓶、袋装食品已启开者，熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者，即失去原食品形状者（食物中毒样品除外）。

(3)按规定采样数量不足者。

对送检符合要求的样品，检验室收到后，应立即进行检验，如果条件不具备，应置4℃冰箱存放，及时准备创造条件，然后进行检验。

6．样品检验时，根据其不同性状，进行适当处理。

(1)液体样品接种时，应充分混合均匀，按量吸取进行接种。

(2)固体样品，用灭菌刀、剪取其不同部位共25g，置于225ml灭菌生理盐水或其他溶液中，用均质器搅碎混匀后，按量吸取接种。

(3)瓶、袋装食品应用灭菌操作启开，根据性状选择上述方法处理后接种。

七、记录和报告的要求

1．检验室收到样品后，首先进行外观检验，及时按照国家标准检验方法进行检验，检验过程中要认真、负责、严格进行无菌操作，避免环境中微生物污染。

2．样品检验过程中所用方法、出现的现象和结果等均要用文字写出试验纪录，以作为对结果分析、判定的依据，记录要求详细、清楚、真实、客观、不得涂改和伪造。

八、特殊样品检验时的前处理

1.食品微生物检测需用灭菌蒸馏水进行稀释的样品有酱腌菜、酱油 2.对食醋样品的前处理是用20%-30%灭菌碳酸钠溶液调PH至中性

3.袋装鲜奶样品进行微生物检验时的处理用无菌手续吸取25mL检样+225mL稀释液 4.碳酸饮料等样品的前处理应开盖后将气体待充分排出，用无菌手续吸取25mL检样+225mL稀释液

10.生物实验操作考核分析 篇十

一、试卷总体情况

本次生物实验考核考试主要考查基本技能，突出考查了学生在具体的环境中，进行思维与能力的训练，较好地体现对实验能力考核要求。

二、考试反映的问题

得失分情况和原因进行分析:大多数题主要考察的是学生对实验技能的掌握情况。从学生试卷可看出还存在许多问题：

1、对实验过程的理解停留在一知半解的层次上；对探究实验的过程比较模糊;

2、解题始终不能把握其中关键的技巧；

3、未养成总结归纳的习惯，不能习惯性的归纳所学的知识点与灵活应用。

4、学习态度差，不积极主动。

三、反思与整改措施：

1、要继续深入钻研课标，加强教研，不断提高教育教学水。

2、狠抓基础知识和基本实验技能的落实。

3、多做探究性实验，最好多让学生亲自动手做，搞清楚每一个步骤，体验探究过程，至少可以使遇到同类问题得以借鉴。

4、深入了解学生，关心他们的学习、生活，了解他们的学习需求，然后按需而教，提高课堂教学效率。

5、要抓质量，先抓习惯。平时在教学中注意抓好学生的书写、审题、与检查等良好的学习习惯。

6、加强基础知识的掌握，对知识的延伸与拓展需要深入了解。

7、注重开发性使用教材，做到吃透教材，把握好教材的重点难点。

11.微生物实验室标准操作程序 篇十一

关键词： 课堂实验教学    生物光学显微镜使用    不规范操作    正确做法

正确使用生物光学显微镜是生物医学等相关专业学生应具备的一项基本实验技能。微观世界的细胞、细菌、真菌、寄生虫等需要在显微镜下观察认识、辨别。规范的操作有利于提高实验效率，保护显微镜，培养学生严谨的工作作风和科学的工作方法[1]。笔者在教学中发现学生使用显微镜时易出现一些不规范的操作甚至错误做法，现结合其他一些文献[2]-[5]，总结如下并加以纠正。

1.取送显微镜时，一只手提着显微镜镜臂。正确的做法是右手握镜臂、左手托镜座。

2.显微镜“长明灯”，基本从上课到结束显微镜光源一直处于亮灯状态。正确的做法是在实验中养成随手关灯的好习惯。显微镜光源无需预热，使用前开启，停用3分钟，即可关闭光源，以延长光源灯泡的使用寿命，节约电能。

3.转换物镜头时借助物镜镜头转动镜头转换器。正确的做法是用食指和拇指捏着转换器的旋转盘转换物镜，以防损坏物镜头的机械精度。转换放大倍数时先降低载物台，转换镜头，再重新调节显微镜寻找视野物象。正确的做法是直接转换物镜头，稍微调节细螺旋即可找到物象，因为精密的显微镜具有较好齐焦精度，即不同放大倍数的物镜头，其焦点大致在一个水平面上。

4.用手指擦拭透镜。正确的做法是用擦镜纸朝一个方向擦拭，不让手指触到透镜，以防划伤玻璃镜头。

5.调焦时过多使用细螺旋。正确的做法是先用粗调节螺旋找到大致的焦点范围，看到模糊的物象，再用细调节螺旋调节出清晰的物像。细调节螺旋的机械装置更精密，经常使用，加速磨损，造成“滑丝”。大范围地调节载物台高度使用细调节螺旋时，好比从北京到上海，人家坐动车，你还在骑自行车。人家车票固然贵些，但你骑坏一辆车，而且效率低。

6.未注意镜头与玻片间距离压碎载玻片。正确的做法是遵循载物台高度调节“先上后下”的原则，避免当载物台上升到一定程度，载玻片与镜头“亲密接触”，甚至超过了物镜头的弹性范围，最先“受伤”的只能是载玻片。对于珍贵的标本片，损坏带来的损失可能非常大，因此尤其要重视这一点。

7.与人交流镜下内容时改变显微镜方向或挪动显微镜。正确的做法是显微镜不动，人围绕显微镜动，因为显微镜移动后可能需要重新对焦。显微镜的目镜头可以转动方向，但只能正面朝向自己或转动180度后的另一面，且要拧紧固定螺丝，以防脱落摔坏。

8.表述镜下内容时，视野不变，按钟表面定位于某个位置。正确的做法是把镜下目标调至视野中央，即在圆心位置。这样做的好处是，便于不同观察者指向目标一致，而且在更换放大倍数观察时，目标不便（需要显微镜具有较高的定位精度）。

9.油镜头用油过多，涂层一大片而且很厚。正确的做法是加香柏油适当即可，油镜头浸入其中，随视野移动，有黏滞性的香柏油被镜头带动。既可节约用油，又便于观察完毕后擦拭。

10.光线强度不当。光线过暗或过于强烈，均不利于观察。低倍镜观察时，正确的做法是适当降低视野亮度，不至于长时间造成眼疲劳，而且视野亮度过高，物象的层次感不强。使用油镜观察时，因有镜头井口率较小，应抬高聚光器，开打光栅，提高亮度。

11.降低视野亮度时直接调低底座光源强度。正确的做法是可以要缩小光圈和下调聚光镜的方法降低视野亮度，直接调低底座光源强度会使白色光源变得昏黄失去“自然光”属性。

12.香柏油污染非油镜头。正确的做法是按“先低倍后高倍”的原则，用了油镜头不应该再转回非油镜头。

13.非油镜头用二甲苯擦拭。正确的做法是非油镜头只能用乙醚乙醇清洁液擦拭。由于不同镜头的材质不同，二甲苯会损坏非油镜头。即使油镜头，也应减少二甲苯的使用。清洁液最好使用乙醚乙醇混合液，尽量避免使用二甲苯，注意安全性。

14.擦拭油镜头大把使用擦镜纸。正确的做法是用一两张小块擦镜纸黏附在香柏油上，滴加数滴清洁液，沿玻片表面拖动，再反过来压在玻片上拖走擦镜纸即可。如不清洁，可重复操作。

15.视野不清洁总找物镜头的原因。正确的做法是先判断污染源再清洁。物镜、目镜和载玻片都有可能造成视野不清：（1）移动载玻片、异物不动，说明污物不在载玻片上，反之则是标本片不清洁;（2）转动转换器，换上高倍镜后，仍可观察到，说明污物不在物镜上，只存在于目镜上;（3）如果转动目镜头，污物也随之转动，则说明在目镜头上。

16.实验完毕后直接将显微镜断电走人甚至电源未关。正确的做法是关闭电源，拔下插头，绕起电源线，检查镜头是否清洁，呈“八”字叉开，载物台降至最低，让显微镜“休息“，盖好防尘罩。

参考文献：

[1]方安宁，严家来.显微镜使用中节约教学资源的体会[J].考试周刊，2008，18：219-220.

[2]王芳.生物显微镜常见故障的排除及维护保养[J].实验室科学，2007，2：171-172.

[3]翦卫星.高职院校教学用显微镜集约化管理探究[J].职业技术教育，2009，35：72-73.

[4]程静华，李平，容哲.形态实验教学中显微镜存在的问题及处理[J].医疗卫生装备，2009，30，（10）：121-122.

[5]曾顺良.学生在显微镜实验教学中存在问题分析及对策[J].职业教育研究，2009，5：118-119.

12.八年级生物实验操作考核小结 篇十二

2014年5月20日早8:30至上午10:15分,汾阳广豪学校生物实验操作考试顺利结束,全体初二学生均参加了此次生物实验操作考试。

面对这次初中生实验操作考核,学校各级领导高度重视;早在4月25日,学校就组织了以校长、副校长为首的领导机构,成立了以教务主任、生物学科组长以及所有的生物教师的考务小组,从而使这次考核工作紧张有序的展开。

4月25日下午,学校初中生实验操作考核考务会召开。会上,教务主任利对“监考及实验准备”、“考核程序”、“评分标准”、“学生考前培训”等工作，做了细致周到的安排。会上,学校还针对可能发生的突发伤害事故制定了“应急预案”,并做具体的安排和部署。

5月20日早7时30分,我校监考人员按要求准时到达实验室考场;我校其他工作人员也各到其位,做好一切考前准备;8时20分参考的学生列队站在实验室门前。开考的哨音吹响后,一切工作紧张、有序、严肃、认真地展开,直至上午10时15分，全部考核工作结束。考试中途，学校的领导来视察工作，给予了我们的实验考核提出了宝贵的意见。指出了一些不足，让我们在以后的考试中更加顺利做的更加完美。

这次考核工作的顺利完成,有赖于学校领导的高度重视和细致周到的工作安排,有赖于全体工作人员团结协作、认真负责的工作作风和实干精神,从而表现出汾阳广豪学校领导和群众和谐团结、奋进向上的精神面貌。

汾阳广豪学校

13.微生物实验室标准操作程序 篇十三

1．基因工程常用的受体细胞有()①大肠杆菌 ②枯草杆菌 ③支原体 ④动植物细胞 A．①②③④

C．②③④

B．①②③ D．①②④

解析：支原体太小了，细胞中唯一可见的细胞器是核糖体，而基因工程要求基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达；因为支原体结构的限制，其所具有的功能不能满足基因工程对细胞的要求，故支原体不能作为受体细胞。

答案：D 2．检测转基因生物是否转录出mRNA，应通过何种分子杂交方法实现()A．DNA—DNA杂交 B．DNA—RNA杂交 C．RNA—蛋白质杂交 D．蛋白质—蛋白质杂交

解析：A、B、D三项分别是在复制、转录和翻译水平上检测基因工程是否成功，C项所述分子杂交方法是不存在的。

答案：B 3．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到探测疾病的目的。基因探针是指()A．用于检测疾病的医疗器械

B．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子 C．合成β球蛋白的DNA D．合成苯丙羟化酶的DNA片段

解析：基因探针是具有特定序列的单链DNA，作用是能检测是否含有目的基因，运用了DNA分子杂交技术；基因探针＝目的基因＋放射性同位素标记。

答案：B 4．检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因的常用方法是()A．DNA分子杂交技术 C．放射性同位素标记技术

B．荧光分子标记技术

D．显微注射技术

解析：检测目的基因常采用DNA分子杂交技术，即在含有目的基因的DNA片段上用放射 性同位素等进行标记，以此作为探针，并使探针与基因组DNA杂交，若显示出杂交带，则表明目的基因已插入染色体DNA中。

答案：A 5．(2016·海南卷)基因工程又称为DNA重组技术，回答相关问题：

(1)在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即________和从________中分离。(2)利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是_______________________________________ _______________________________________________________ _____________________________________________________。

(3)在基因表达载体中，启动子是________聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是________。

(4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有________和________颗粒。

解析：本题主要考查目的基因的获取方法、基因表达载体的构建方法、目的基因导入植物细胞的方法。

(1)在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，既可在核苷酸序列已知的情况下人工合成，也可用限制酶对生物材料的DNA切割，再选取。

(2)cDNA文库是由mRNA反转录获得的，其中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因。

(3)在基因表达载体中，启动子是RNA聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是大肠杆菌。

(4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有金粉和钨粉颗粒。

答案：(1)人工合成 生物材料

(2)cDNA文库中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因

(3)RNA 大肠杆菌(或细菌)(4)金粉 钨粉

A级 基础巩固

1．下列不属于获取目的基因的方法是()A．利用DNA连接酶复制目的基因 B．反转录法 C．从基因文库中获取目的基因 D．利用PCR技术扩增目的基因

解析：对目的基因(DNA片段)进行复制需利用DNA聚合酶而不是DNA连接酶。答案：A 2．下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是()A．需要限制酶和DNA连接酶 B．必须在细胞内进行

C．抗生素抗性基因可作为标记基因 D．启动子位于目的基因的首端

解析：基因表达载体的构建是指目的基因与载体结合，在此过程中需用同一种限制酶切割目的基因与载体，用DNA连接酶将互补的末端连接起来；基因表达载体的构建是在细胞外进行的；基因表达载体包括启动子(位于基因首端使转录开始)、终止子、目的基因和标记基因。

答案：B 3．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中由三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用是()A．促使目的基因导入受体细胞中 B．促使目的基因在受体细胞中复制 C．促使目的基因容易被检测出来 D．检测目的基因是否成功表达

解析：标记基因表达的荧光蛋白使目的基因容易被检测出来。答案：C 4．基因工程的正确操作步骤是()①目的基因与运载体相结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③检测目的基因的表达

④提取目的基因

A．③④②①

C．④①②③

B．②④①③ D．③④①②

解析：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：(1)目的基因的获取，即④提取目的基因。

(2)基因表达载体的构建，即①使目的基因与运载体结合。(3)将目的基因导入受体细胞，即②。

(4)目的基因的检测与表达，即③检测目的基因的表达。答案：C 5．某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产 生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是()A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒 B．RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶

C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D．在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌

解析：导入大肠杆菌的质粒可能为重组质粒，也可能为普通质粒，A项错误；构建基因表达载体过程中需要限制酶和DNA连接酶，不需要RNA聚合酶，B项错误；由于目的基因要插入到基因B中，即抗氨苄青霉素基因破坏，即工程菌不能抗氨苄青霉素，因此不能用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒，C项错误；据分析可知，在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌，D项正确。

答案：D

B级 能力训练

6．科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如图。

(1)基因工程的核心是__________________________________。

(2)上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了________法，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中，然后用该农杆菌感染植株细胞，通过DNA重组将目的基因插入植株细胞的________上。

(3)目的基因在棉株体内能否成功转录，分子水平上可采用________方法检测。(4)如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的卵细胞中________(填“一定”或“不一定”)含有抗虫基因。

解析：(1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。

(2)将目的基因导入棉花细胞内使用了农杆菌转化法，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T­DNA中，然后用该农杆菌感染植株细胞，通过DNA重组将目的基因插入植株细胞的染色体上。(3)目的基因在棉株体内能否成功转录，从分子水平上检测可采用分子杂交法。(4)由于在产生配子的过程中，细胞质基因是随机分配的，因此产生的配子中不一定含有抗虫基因。

答案：(1)基因表达载体的构建(2)农杆菌转化 T­DNA 染色体(3)分子杂交(4)不一定

7．科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关该基因工程的叙述，错误的是()A．采用反转录的方法得到的目的基因有内含子

B．基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的 C．马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞

D．用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可产生黏性末端而形成重组DNA分子

解析：真核基因结构中，内含子部分不能编码蛋白质。在转录形成成熟的mRNA的过程中，内含子转录部分被剪切，因此采用反转录法得到的目的基因不含内含子，故A项错误；非编码区虽然不能编码蛋白质，但对于遗传信息表达是不可缺少的，在它上面由调控遗传信息表达的核苷酸序列，比如RNA聚合酶结合位点，对目的基因的表达必须先有RNA聚合酶与之结合，才可转录形成信使RNA，故B项正确；受体细胞可以是受精卵，也可以是体细胞，如叶肉细胞，故C项正确；用同一种限制酶处理质粒和含目的基因的DNA，可产生相同黏性末端，再用DNA连接酶连接形成重组DNA分子，故D项正确。

答案：A 8．用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的胰岛素，下列叙述错误的是()A．用相同的限制酶处理目的基因和质粒

B．DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶 C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D．导入大肠杆菌的目的基因不一定成功表达

解析：基因工程中，用相同的限制酶处理目的基因和质粒使它们露出相同的黏性末端，A正确；DNA连接酶和限制酶是构建重组质粒必需的工具酶，B错误；质粒上的抗生素抗性基因是标记基因，所以可以用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒，C正确；导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达，D正确。

答案：B 9．如图表示一项重要生物技术的关键步骤，X是获得外源基因并能够表达的细胞。下列说法不正确的是()5

A．X是能合成胰岛素的细菌细胞

B．质粒通常有多个标记基因和多个限制酶切点 C．基因与运载体的重组只需要DNA连接酶 D．该细菌的性状被定向改造

解析：X是含有胰岛素基因的细菌细胞分裂形成的，含有胰岛素基因，因此能合成胰岛素，A项正确；质粒通常有多个标记基因和多个限制酶切点，这样便于目的基因的插入和筛选含有重组DNA的细胞，B项正确；基因与运载体的重组除了需要DNA连接酶，还需要限制酶，C项错误；基因工程能定向改造生物的性状，该细菌是采用基因工程技术培育形成的，因此其性状已被定向改造，D项正确。

答案：C 10．在基因工程操作技术中，为保证目的基因更好地导入受体细胞，有时需要用Ca处理。下列有关叙述，正确的是()A．显微注射法中要用Ca处理动物受精卵 B．花粉管通道法中要用Ca处理植物体细胞 C．农杆菌转化法中要用Ca处理植物细胞 D．农杆菌转化法中要用Ca处理农杆菌细胞

解析：用Ca处理原核细胞，会增大细胞壁的通透性，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，即感受态。在农杆菌转化法中，需要把构建好的重组载体(重组Ti质粒)先导入原核细胞——农杆菌细胞中，此时需要用Ca处理，然后再把含重组Ti质粒的农杆菌导入植物细胞。

答案：D 11．如图为基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法。相关叙述中正确的是()

2＋2＋

2＋2＋2＋2＋

2＋

A．这三种方法都是在体内进行的 B．①②③碱基对的数量和排列顺序相同 C．方法a和c均用到DNA聚合酶 D．方法c需要模板

解析：题中三种方法都是在体外进行的，且都用到酶(方法a需要反转录酶和DNA聚合酶，方法b需要限制酶，方法c需要DNA聚合酶)，A错误、C正确。方法a得到的目的基因不含有内含子，方法c得到的目的基因的碱基序列可能有多种，因此①②③碱基对的数量和 6 排列顺序不相同，B错误。方法c不需要模板，D错误。

答案：C 12．(2015·重庆卷)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是()A．表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点 C．借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D．启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用

解析：本题考查基因工程相关知识。A项，胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，人肝细胞无胰岛素mRNA，故错误。B项，复制原点是基因表达载体复制的起点，而胰岛素基因表达的起点位于启动子，故错误。C项，在细胞培养液中加入抗生素，只有含胰岛素基因的受体细胞才能存活，即借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来，故正确。D项，启动子在胰岛素基因的转录中起作用，终止密码子在翻译中起作用，故错误。

答案：C 13．已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问题：

(1)为了获得丙种蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙种蛋白质的________序列，据此可利用________________方法合成目的基因。获得丙种蛋白质的基因还可用________和________方法。

(2)在利用上述丙种蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需要使用________酶和________酶。

(3)将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗________的危害。

(4)若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子________(填“含有”或“不含”)丙种蛋白质基因。

解析：(1)为了获得丙中蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出控制丙中蛋白质的基因的核苷酸序列，据此可利用化学方法合成目的基因。获得丙中蛋白质的基因还可用基因文库、PCR方法。(2)在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用限制酶和DNA连接酶。(3)将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗乙种昆虫的危害。(4)若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子不含丙种蛋白质基因，因为基因不能跨细胞转移。

答案：(1)基因的核苷酸 化学 基因文库 PCR(2)限制 DNA连接(3)乙种昆虫(4)不含

14．转基因生物可用于生产人类所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。下图甲是通过生物工程培育能产生人胰岛素的烟草的过程。请据图回答下列问题：

图甲

(1)基因工程的核心步骤是________(填字母)。此过程所需的工具酶是________。(2)下图乙是载体和反转录得到的胰岛素基因的片段，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。GeneⅠ和GeneⅡ为质粒上的标记基因，根据图示分析，应用限制酶________切割质粒，用限制酶________切割目的基因。构建的重组质粒中，除含有外源基因、标记基因外，还必须含有________和________。

图乙

(3)B过程中，常用________处理使细菌成为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入。(4)如果从分子水平检测人胰岛素基因是否表达成功，可以采用____________方法。解析：(1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，即A过程，该过程首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子。

(2)用限制酶Ⅱ切割质粒时会将两个标记基因都破坏，因此只能选用限制酶Ⅰ切割质粒，而切割含有目的基因的外源DNA分子时，只需用限制酶Ⅱ即可，构建的重组质粒中，除含有外源基因、标记基因外，还必须含有启动子和终止子。

(3)将目的基因导入微生物细胞时，常用感受态细胞法，即常用Ca处理使细菌成为感受态细胞，从而利于重组质粒的导入。

(4)从分子水平上检测目的基因是否表达成功，可以采用抗原—抗体杂交方法。答案：(1)A 限制酶和DNA连接酶

2＋(2)Ⅰ Ⅱ 启动子 终止子(3)Ca

(4)抗原—抗体杂交