实验动物学心得体会

2024-07-27

实验动物学心得体会(共8篇)

1.实验动物学心得体会 篇一

来美国加州已经整整1个月,昨天才刚刚办好学校的身份卡,终于可以正式接受动物实验培训了。今天上午,本来是一个来自印度的博士负责培训,但后来她需要去上课,临时换成一个华裔博士(他不会说中文,我只听他说过“剪头发”三个字),这个陈博士很有一些侠客风骨,什么事情都比较主动帮助。他告诉我,最近几天的时间他都可以给我支配,让我十分感动。本文也作为来美1月的体会小结吧。

我要学习的具体内容是如何神经外手术后脑损伤动物模型,就是把老鼠的大脑大概1/6的部位切除。这个实验最重要的是保持手术过程的一致,由于手术容易脑出血,因此手术操作尽量轻柔。

今天上午9点前我早早来到实验室,等到10点后,陈博士过来来说现在就可以开始,我说很遗憾,12点我必须离开,因为我女儿的入学体检安排在1点,第一次做实验怕干不完,言外之意是等明天再说吧。他说没关系,干到什么程度你随时可以离开,我心里说那多么不好意思,如果试验进行到一半,后续的整理要老师来负责。不过我也希望能早点开工,于是就接受了。毕竟开始的有些突然,我本来是准备在他指导下自己来做全部的工作,结果大部分事情都是他帮忙,包括把动物从动物房拿到实验室,准备手术器械,准备手术显微镜等。整个实验中,所有的准备工作几乎都是陈博士代劳,我只做了最核心的工作,我想起在国内读博士的时候,许多技术活都是从打下手,当学徒开始的。

由于第一次做这个实验,动作比较缓慢,到12点才终于把脑子切掉,后面的缝合,以及动物护理等都没有时间做了,这些内容都留给陈博士了。

开始前,陈博士问我为什么要用这个模型,你过去不是做脑出血的模型吗?我说主要是觉得这个损伤是属于计划性损伤,比较符合临床实际,很适合开展预适应方面的研究。另外我觉得在中国目前使用的比较少,我也希望能把这个模型引进到中国。他听后非常高兴,认为我的观点是非常好的,他也这么认为。

结合最近见习的训练的情况,我觉得这里关于动物实验方面值得学习的内容有许多。这里暂时只讲几点体会。

一是对动物的管理非常严格。动物房的条件非常好,比实验室的卫生条件还要好,居住空间有明确的规定,一只大笼子内只能有2只大鼠。进入动物房必须登记,拿走几只动物,动物的编号和实验目的要详细记录。

二是实验步骤的记录非常详细。到具体实验过程,详细的记录更能体现。每只动物都有一个档案,编号,体重,麻醉时间,手术时间,每一个具体的操作步骤都有详细的记录。动物模型做好后,经过适当恢复,送回动物房,仍需要登记。当处死动物前,每个都需要进行行为学的记录,进行动物一般情况的观察和记录。然后处死动物,处死动物必须采用安乐死。动物处死后取出大脑要进行照相记录,然后根据实验目的对脑组织进行后续的处理。总之,在关于动物实验的整个过程都有非常详细的记录。如果那个动物有可能出现异常结果,可以回头寻找原因。过去有许多老师在进行研究生培养的督导时,经常建议能作好原始记录,但都是强调记录本如何规范,对内容和细节并不关心,实际上记录本的方式并不是理想的记录方式。原始记录不一定都要在一个本子上体现。

三是协作精神。我来这里一个月,听到最多的问题是,你要做什么研究,我们是否可以谈谈,实际上大家都非常相互关心别人的研究内容,随时开展相互讨论,相互请教的事情也随时可见,也有许多人出来结果过来请教如何解释。我的研究内容涉及到几个基本的内容,其中一个是动物模型,因为过去没有做过需要从头学习,结果本组内至少有一大半人都积极要求指导。即使那些不主动的,去看他们实验也是随时停下来让我看,并耐心给我解释注意细节。总的感觉是他们都希望把自己所有经验,所有技巧都不作任何保留传授给你。另外一个研究内容是动物行为学检测,这个因为需要其他人协助双盲对照,结果早就有人预约说可以帮助解决。总之,在这里大家的相互协作精神非常的普遍。你不会看到有人怕别人学走你的思想,怕别人掌握了你独门绝技。

2.实验动物学心得体会 篇二

1 加强团队精神

近几年入学的大多数是独生子女,缺乏团结合作意识。以往的传统实验虽也分组进行,但很多同学在操作时还是只做老师分配给自己的那一部分,只观察自己要观察的那一部分,在实验报告中互相抄袭,因此效果不佳。可以采取下述方法:提前让班干分组,如4人一组,可以寝室为单位,或男女搭配,每小组安排一名小组长,负责安排各个同学的分工。每个小组是一个整体,实验前应集体预习实验内容,每个人心中有数,该做什么,怎么做,实验过程中互相配合,结束后小组内共同讨论分析实验结果,并共同完成一份实验报告。实验报告的成绩记做小组的共同成绩。这种方法既可以节约时间提高效率,又加强了团结合作意识,对今后的学习和工作非常重要[2]。

2 学会统筹方法

病原生物学的很多实验可能和其它科目不太一样,并不是一个连续进行的,实验操作时间可能并不长,但整个实验过程却很长,往往超过2节课的时间。如何用最短的时间来完成实验呢?合理地使用统筹方法,可以节约实验时间,提高实验效率。如在做实验a细菌的接种及生长现象和实验b消毒灭菌实验时,因需要18~24h后才能观察实验结果,可以在实验a操作后第2天观察实验a结果,并进行实验b。而在实验b中,可先安排同学先做紫外线灭菌实验,(紫外线照射需要30~60min),在30~60min期间可做煮沸消毒实验,(此过程需要10min),在10min内可以做皮肤手指消毒实验,这样大大提高了实验效率。

3 学会思考设计实验,分析实验失败原因,尽可能重复实验

实验中最重要的并不是操作,操作的不熟练可以通过勤学苦练、重新增加熟练程度,更加重要的应是学会思考设计实验,分析实验失败原因。很多同学做实验只是单纯课堂80min--做实验。实验前不预习不思考不设计,实验后不分析实验结果,抄袭实验报告。其实,实验前的思考设计预习很重要,做到心中有数,实验结束后,尤其失败了,更要分析原因,要让学生明确"犯错误"是一个很好地学习过程,错误的实验结果并不一定都是"坏结果"[3],指导学生找到原因,并尽可能重复实验,当然要把失败的原因纠正。这样才能更好地提高学生的分析问题及解决问题的能力。

参考文献

[1]钟有添,王立.开放设计性实验在病原生物学实验教学中的实践[J].赣南医学院学报,2009,29(5):711~712.

[2]毛露甜,王绍芬.微生物学实验教学中开展设计性实验的做法与体会[J].微生物学通报,2007,34(3):614~616.

3.实验动物学心得体会 篇三

一、强化课前预习

由于医学微生物学在医学课程中开设较早,有关医学的整体概念还未在医学生中形成,他们对微生物学实验课程中许多技术和操作要求都比较陌生,这种情况下,实验课的预习就显得十分重要,有利于做好充分的知识准备,在每次实验之前做到心中有数。这样与老师之间的互动也会增加和顺畅:在得出实验结果后,通过细致的分析比较,增进了对理论知识的认识与理解。

二、重点强调实验目的和原理

带教老师要深入浅出地讲解每次实验的目的和原理,让同学们知道用此种实验方法可以达到什么目的,以及它的实验原理。以利于进一步了解这种实验的长处和短处。有一些同学可能不太重视对实验目的和原理的理解,把主要精力放在实验的操作步骤和注意事项上。带教老师要及时加以引导和解释,了解实验原理,有利于我们理解实验中为什么这样操作,为什么在操作过程中要注意这些事项。在实验失败的时候,也容易找到失败的原因,只有这样才能全面占领一种实验方法和技能。在学校组织的开放实验活动中,让同学们自己独立思考,利用这些已学的实验方法进行实验设计,逐步提高他们的科研设计能力和创新能力,同时激发了同学们对科学实验的兴趣。

三、须掌握一些基本的实验试剂、器材、培养基的功能作用

不要盲目地让学生进行实验操作,而不深入讲解这些试剂,器材,培养基的功能和作用,往往造成在同学完成实验后,还是不能灵活应用已学过的知识和技术。例如,在进行细菌学实验前,讲解接种环和接种针的不同之处。讲解中性复红和酸性复红的不同作用,讲解双糖培养基和普通培养基的不同用途。要让同学知其然,知其所以然,为以后开展大学生开放性实验活动做知识准备。

四、协调好实验秩序、强调实验态度需认真、严谨

在一些微生物学实验过程中,同学需要经常走动,例如在革兰染色实验时,需反复洗片,来回穿梭在水池和实验台之间,带教老师要维护好实验秩序,让同学们有条不紊的进行,否则容易耽误染色、脱色时间,同学之间相互拥挤容易把染色液洒落,也容易把玻璃片打碎,所以老师需要从整体上协调好实验秩序。有部分同学在实验过程中可能态度不认真、不严谨,认为是一种简单的操作,不严格按照“无菌操作”要求,实验随意性很大;此时带教老师要及时指出同学的错误,要求其严格遵守操作规范,强调做事的态度,让他们认识到当代医学生的重要责任与使命。

五、多列举临床实践或社会生活中出现的案例

许多同学不知道微生物学实验在今后临床工作和科研活动中的重要作用,很有必要加以说明,以引起他们的重视,使同学们了解微生物学实验课的重要意义和价值。如在美国发生“9.11事件”后,一些恐怖分子发动了生物恐怖袭击,在信封中装入含炭疽杆菌的白色粉末,导致多人致病和死亡的事件。因此在实验教学中,我们利用多媒体技术向同学们展示了炭疽杆菌的形态特征、染色性、对抗生素的敏感性以及在环境中存活的条件等,使同学们受益非浅。同时,面对目前严峻的大学生就业形势,提醒他们只有通过现在努力。训练提高自己的实践能力,才能为以后找工作和研究生面试中的实验操作考核打下基础。

六、强调实验的客观性、尊重实验的客观事实

有些同学实验虽然失败了,但任意修改实验结果,则是一种极其不良的科研实验行为,不诚信行为。让同学们充分了解其危害性,若形成习惯之后,不利于今后发展。要让同学们知道:失败并不可怕,可怕的是你对待真理的态度。第一次做实验失败了,很正常,可以重复多做几次,反而增加了自己对实验的体会。训练了自己的实验操作能力,从而获得更大的进步。对待实验过程及结果的端正态度往往比实验结果的成败更加重要。

七、建立良好的师生互动关系

良好的师生关系,有助于相互理解,有利于教学互动,有利于老师及时发现学生的操作和认识中的错误之处,可及时给予纠正。师生之间通畅的沟通还有利于学生及时向老师反映出自己的不足之处或困惑,根据个别同学反映的情况。往往可能是普遍存在的问题,此时带教老师可立即补上,作为经验在下一次教学过程中加以改进。这样的教学互动,能够到达很好的教学效果,带教老师的水平也可快速提高。

八、注重实验课后的总结与讨论

很多同学会认为实验操作完成了,实验就结束了。要让同学们知道对结果的分析和总结同样是重要的实验内容。每次实验完成后,实验老师要带领同学们仔细观察实验结果,并对结果进行透彻的分析;对失败的结果要认真分析。找到错误的原因。例如在致病性肠道杆菌双糖培养基接种实验中,部分同学双糖培养基的乳糖部分发生了酵解,下层的葡萄糖产酸产气,说明可能在麦康凯培养基中挑取无色致病性肠道杆菌菌落时沾染了大肠埃希菌的菌落,而出现此现象。认真带领同学们讨论实验结果,有利于不断提高实验的成功率,总结实验操作经验,培养同学们的实验分析能力。提升其科研思维素养。

九、对青年教师的要求

青年教师在实验教学中要不断提升自己的教学水平,积极参与实验课教学准备工作,认真做好预实验。通过实验教学准备,青年教师能够更深刻、更全面地理解理论知识,树立实验的系统观,掌握实验方方面面的细节,有利于提高教学质量和自身教学水平。

当今世界竞争日趋激烈,但最终还是人才的竞争。在新时期背景下,如何为国家和社会培养出高水平的医学人才,是摆在广大医学教育工作者面前的艰巨任务。高级医学人才是我国的急缺人才,广大微生物学教育工作者需加强交流与合作,不断推进医学教育的信息化发展,促进医学微生物学教学的交流和学习。利用多媒体技术,生动展示病原微生物的真实面貌及临床致病特点,提高广大医学生的学习兴趣和学习效率。

参考文献:

[1]李凤云,闵宏林,刘婷婷.更新微生物学教学手段,培养学生开拓与创新精神[J].山西医科大学学报(基础医学教育版),2005,7(6):562-563.

4.动物繁殖学实验心得 篇四

1.熟悉人工授精所用的采精和输精器械,了解其用途及使用方法。

2.练习安装假阴道。

二、材料和仪器设备

(一)采精器材 牛羊猪马的采精用假阴道,牛羊电刺激采精棒,猪采精用的橡胶手套

(二)输精器材 牛羊猪马输精器,阴道开张器,额灯和手电筒

(三)辅助器材 高压灭菌器,酒精灯,长柄钳,镊子,玻璃棒,温度计

(四)药 品 灭菌凡士林,75%和95%酒精棉球,滑石粉,来苏儿,洗衣粉

三、方法和步骤

(一)人工授精器材的清洗与消毒

(二)假阴道的安装调试

实验二 精子活率评定

一、目的和要求

掌握评定精子活力的方法及评价指标;验证外界因素对精子运动及生存能力的影响;。

二、材料和仪器

(一)精液 牛、羊、猪等任一种动物的精液

(二)器械 显微镜,显微镜保温箱(或显微镜恒温台),载玻片,盖玻片,搪瓷盘,温度计,滴管,擦镜纸,纱布,有刻度试管,计数器

(三)药品 5%伊红

三、内容和方法

(一)精液的肉眼检查

(二)评定精子的活率

(三)外界因素对精子活率的影响

实验三 精子密度测定

一、目的和要求

掌握检查精子密度的几种方法。要求学生熟练掌握血细胞计数方法。

二、材料和仪器

(一)材料 牛精液、猪精液

(二)器材 显微镜,血吸管,红细胞和白细胞吸管,血细胞计数室,载玻片,盖玻片,200 µl枪头,细乳胶管,5 ml试管,1 ml 移液枪及枪头

(三)药品 3%氯化钠,乙醚,95%乙醇,去离子水

三、内容和步骤

(一)目测法

(二)计数法

实验四 精子畸形率的测定

一、目的和要求

掌握精子畸形率的测定方法。

二、材料和器械

(一)材料 牛、羊、猪或兔等任何一种家畜的新鲜精液或冷冻精液

(二)器械 高倍显微镜,计数器,载玻片,盖玻片

三、内容和步骤

1、制作精液抹片。

2、浸入无水酒精中固定2~3 min,取出风干。

3、放人石碳酸复红染色液中l0~15 min,然后清水中蘸2次。

4、迅速通过美蓝染色液。

5、水洗后风干

6、在高倍镜或油镜下观察200个精子计算出各类头部畸形精子的比例。

实验五 稀释液配制及精液稀释

一、目的和要求

掌握稀释液配制的基本程序和操作方法及稀释精液的方法。

二、材料和器械

(一)材料 鸡蛋、原精液

(二)器材250ml三角瓶,250ml烧杯,100ml量筒,感量为0.1克的天平,玻璃漏斗,电炉,石棉网,玻璃棒,定性滤纸,消毒纸巾,硫酸纸,灭菌牛皮纸,橡皮筋,10ml一次性注射器,1 ml注射器,5 ml注射器,75%酒精棉球

(三)药品 葡萄糖,柠檬酸钠,青霉素,链霉素

三、内容和步骤

(一)玻璃用品的清洗与消毒

(二)天平的标准

(三)称量药品

(四)溶液配制

实验六 兔的超数排卵

一、目的和要求

了解主要促性腺激素的作用。初步掌握冲卵和检卵技术。

二、材料和器械

(一)动物 4只供体母兔, 2只公兔

(二)器具 玻璃注射器,兔用手术台,实体显微镜、手术刀

(三)药品 FSH,PMSG,HCG,75%酒精,冲卵液

三、内容和步骤

(一)供体兔超数排卵处理

1.FSH处理 2.PMSG处理

3.对照组处理

(二)手术冲胚方法

(三)早期胚胎观察

实习七 母畜的发情鉴定

一、目的和要求

1.掌握母畜发情鉴定的各种方法,判断输精或配种时间。

2.掌握牛直肠检查的基本操作方法。

二、材料和器械

(一)材料 母畜(牛、羊、猪)、试情公畜

(二)用具 六柱栏或保定架,开腔器,手电筒,脸盆,毛巾,肥皂,长臂手套

(三)药品 凡士林,70%酒精,消毒液

三、方法和步骤

(一)外部观察法

(二)试情法

(三)阴道检查法

(四)直肠检查法

实习八 输 精

一、目的和要求

了解各种家畜的输精过程,掌握家畜的输精操作方法。

二、材料和器械

(一)材料 发情的母牛、精液

(二)用具 保定架,灭菌的输精器(金属或玻璃),卡苏枪,脸盆,肥皂,长臂手套

(三)药品 75%酒精棉球

三、方法和步骤

(一)输精前的准备

(二)各种家畜的输精

实习九 种鸡的采精和输精

一、目的和要求

通过实习,初步掌握公鸡的按摩采精和母鸡的输精操作技术。

二、材料和器械

(一)材料 公鸡、产蛋母鸡各8只

(二)用具 剪毛剪,集精杯,输精器,显微镜,纱布,保温瓶

(三)药品 稀释液

三、方法和步骤

(一)公鸡的按摩采精

5.实验动物学实验 篇五

目的

了解并熟悉实验动物实验操作的基本方法和技术。内容

注射方法;麻醉方法;动物编号的方法;采血;动物性别鉴定;动物的致死。学习打结、缝合、固定动物等。播放录像《太行山猕猴》、《动物的捉拿和给药途径》。用品

大白鼠、小白鼠、蟾蜍、家兔,常用手术器械、注射器、小木锤、大小鼠固定器,戊巴比妥钠,乙醚、士的宁、乙醚、氯仿、氯化钾、一氧化碳、二氧化碳

常用实验动物性别鉴定

1、大、小鼠的性别鉴定

离乳仔鼠性别鉴定主要以生殖器与肛门之间的距离长短及肛门与生殖器有无被毛为标志。识别要点是:① 雄性的生殖器与肛门之间的距离较远,雌鼠较近;② 雄性的生殖器与肛门之间有毛;③ 雄性的生殖器突起较雌鼠大;④ 雌鼠乳头较雄鼠明显。成熟后,雄性可见阴囊,雌性乳头明显而易于区分。

2、豚鼠的性别鉴定

豚鼠的性别鉴定主要是通过生殖器形态来判断。雌性外生殖器阴蒂突起比较小,用拇指按住阴蒂突起,余指拨开大阴唇的皱褶,可见阴道口呈”V”形(注意发情间期的闭锁现象,即一种除了发情和分娩时外,关闭阴道口的细胞结构);雄性外生殖器有包皮覆盖的阴茎小隆起,用拇指按住其基部包皮,可见龟头向外突出。

3、兔子的性别鉴定

幼兔的性别鉴定主要以尿道开口部与肛门之间的距离及尿道开口部的形状来判别。哺乳期仔兔,雄性尿道开口部与肛门之间的距离较远,为雌性的1.5-2倍,雌性较近。雌性尿道开口扁形,大小与肛门同;雄性圆形,略小于肛门。1月龄仔兔,雄性生殖孔呈圆形,翻出可见呈圆柱体的突起;雌性生殖孔呈Y形,翻出仅见有裂缝,裂缝及于肛门。3月龄以上成年兔,雄性阴囊明显而雌性无阴囊;雄性头大短而圆而雌性头小略呈长形。

4、猫的性别鉴定

幼猫的性别是根据生殖器与肛门的距离来判断。距离远者为雄性,距离近者为雌性。

5、猴类的性别鉴定

猴类性别的区分较为困难。首先检查尿道开口,许多雌性动物有较大的阴蒂,其腹侧形成沟状通向尿道口,而雄性动物的尿道开口在阴茎头上。触摸阴囊内是否有睾丸是确定其雌雄的最可靠办法。

常用实验动物处死

大鼠和小鼠的处死方法

1、脊椎脱臼法

右手抓住鼠尾用力向后拉,同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头,将脊髓 与脑髓拉断,鼠便立即死亡。

2、断头法

实验者戴上棉纱手套,用右手握住大鼠头部,左手握住背部,露出颈部,助手用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉。小鼠处死法相同。

3、击打法

右手抓住鼠尾,提起,用力摔击其头部,鼠痉挛后立即死亡。用小木锤用力击打鼠头部也可致死。

4、急性大失血法

可采用鼠眼眶动脉和静脉急性大量失血方法使大小鼠立即死亡。

5、化学致死法

吸入一氧化碳,大、小鼠在一氧化碳浓度为0.2-0.5%环境中即可致死。皮下注射士的宁,吸入乙醚、氯仿,均可致死。士的宁注射量,小鼠为0.76~2.0mg/kg体重,大鼠3.0-3.5ml/kg体重。氯化钾处死大鼠剂量:25%溶液0.6ml/只静脉注入。

实验动物的处死方法很多,应根据动物实验目的、实验动物品种(品系)、以及需要采集标本的部位等因素,选择不同的处死方法。无论采用哪一种方法,都应遵循安乐死的原则。安乐死是指在不影响动物实验结果的前提下,使实验动物短时间无痛苦地死亡。处死实验动物时应注意,首先要保证实验人员的安全;其次要确认实验动物已经死亡,通过对呼吸、心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察,对死亡作出综合判断;再者要注意环保,避免污染环境,还要妥善处理好尸体。

一、颈椎脱臼处死法

此法是将实验动物的颈椎脱臼,断离脊髓致死,为大、小鼠最常用的处死方法。操作时实验人员用右手抓住鼠尾根部并将其提起,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,用左手拇指、食指用力向下按压鼠头及颈部,右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方,造成颈椎脱臼,脊髓与脑干断离,实验动物立即死亡。

二、断头处死法

此法适用于鼠类等较小的实验动物。操作时,实验人员用左手按住实验动物的背部,拇指夹住实验动物右腋窝,食指和中指夹住左前肢,右手用剪刀在鼠颈部垂直将鼠头剪断,使实验动物因脑脊髓断离且大量出血死亡。

三、击打头盖骨处死法

主要用于豚鼠和兔的处死。操作时抓住实验动物尾部并提起,用木锤等硬物猛烈打击实验动物头部,使大脑中枢遭到破坏,实验动物痉挛并死亡。

四、放血处死法

此法适用于各种实验动物。具体做法是将实验动物的股动脉、颈动脉、腹主动脉剪断或剪破、刺穿实验动物的心脏放血,导致急性大出血、休克、死亡。

犬、猴等大动物应在轻度麻醉状态下,在股三角做横切口,将股动脉、股静脉全部暴露并切断,让血液流出。操作时用自来水不断冲洗切口及血液,既可保持血液畅流无阻,又可保持操作台清洁,使实验动物急性大出血死亡。

五、空气栓塞处死法

处死兔、猫、犬常用此法。向实验动物静脉内注入一定量的空气,形成肺动脉或冠状动脉空气栓塞,或导致心腔内充满气泡,心脏收缩时气泡变小,心脏舒张时气泡变大,从而影响回心血液量和心输出量,引起循环障碍、休克、死亡。空气栓塞处死法注入的空气量,猫和兔为20~50ml,犬为90~160ml。

六、过量麻醉处死法

此法多用于处死豚鼠和家兔。快速过量注射非挥发性麻醉药(投药量为深麻醉时的30倍),或让动物吸入过量的乙醚,使实验动物中枢神经经过过度抑制,导致死亡。应用戊巴比妥钠注射麻醉致死。豚鼠可用其麻醉剂量3倍以上剂量腹腔注射。猫可采用本药麻醉量的2~3倍药量静脉注射或腹腔内注射。兔可用本药80~100ml/kg的剂量急速注入耳缘静脉内。狗可用本药100mg/kg静脉注射。

七、毒气处死法

让实验动物吸入大量CO2等气体而中毒死亡。吸入二氧化碳,此法安全、人道、迅速,被认为是处理啮齿类的理想方法,国外现多采用此法。可将多只动物同时置入一个大箱或塑料袋内,然后充入CO2,动物在充满CO2的容器内l~3min内死去。

人类为什么总拿小白鼠做实验?

原因一:

老鼠中的小白鼠的基因序列和人类的差不多,一些医学的科研和临床实验都是有小白鼠来完成的。当中以小白鼠做遗传学实验很好,因为它的全基因组和人类的相似度极高,很多人类难以治愈的疾病可以在小白鼠身上找到相似性状,从而加以实验发现治病基因。

原因二:

实验专用白鼠的生物学意义较大,纯系小鼠的培育方法经过百年探索已经形成固定流程,培育出的小鼠几乎完全没有个体差异(生理上),而在一般的自然种群中,同种动物间的个体差异是很大的(尽管外表相同),主要表现在先天的身体素质上。生理上没有个体差异是否意味着气质上没有差异尚不明了,不过选择纯系实验白鼠主要还是为了尽可能的减少先天的个体差异。

原因三:

数量充足,许多实验需要统计学分析,这就要求一定的数量,大白鼠和小白鼠,特别是小白鼠,在人工繁殖条件下,能满足这一要求。种系纯,好的实验要对实验动物的品种严格控制,这用小白鼠就容易解决。

还有动物等级,小白鼠好歹也是哺乳动物,除了体形小,与其它哺乳动物的进化水平相比并不差。体形小反而成为人工繁殖喂养的有利条件。

原因四:

其实很多实验用猩猩等与人更近似的动物做最好,但使用猩猩太昂贵了。许多实验,比如认知类的,实验结束后时需要将动物杀死,来检查其内部变化的。这样,大量的实验肯定就不能用比较“贵重”的猩猩了。

实验

二、常用实验动物采血、血细胞计数

1、小白鼠的采血 目的:

了解并熟悉小白鼠的采血方法; 掌握小白鼠眼眶后静脉丛采血。

用品: 二甲苯棉球、1%肝素溶液、1%可卡因、乙醚、刀片、无钩弯镊子、弯止血钳、微量采血针、剪刀、剪毛剪、锋利刀片、注射器。内容:

1、剪尾采血:需血量少时可用此方法。将动物固定,显露尾部,将尾尖剪去约5mm,从尾根部向尾端部按摩,血即从断端流出。若用二甲苯棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟,使尾部血管充盈,可采到较多的血,但注意二甲苯可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出,采血后,消毒,止血。如将动物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血约0.1ml,大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。

2、摘眼球采血:此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动物,压迫眼球,尽量使眼球突出,右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球,立即将鼠倒置,头朝下,眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活,可采另一侧眼球取血。

3、眼眶后静脉丛采血:用7—10cm长的微量采血针。将取血管浸入1%肝素溶液,干燥后使用。采血时,左手拇指和食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定,并用中指配合,轻轻压迫颈部两侧,阻碍静脉回流,使眼球充分外突,提示眼眶后静脉丛充血。可用少量1%可卡因滴入动物眼内,使眼部局部麻醉。右手持取血管,将其尖端插入内眼角与眼球之间,轻轻向眼底方向刺入,小鼠刺入约2—3mm,大鼠刺入约4—5 mm,当感到有阻力时即停止刺入,旋转取血管以切开静脉丛,血液即流入取血管中,采血结束后,拔出取血管,放松左手,出血即停止。用本法短期内可重复采血。小鼠一次可采血0.2—0.3 ml,大鼠一次可采0.5—0.1ml。

4、颈静脉或颈动脉采血:将鼠麻醉,剪去一侧颈部外侧被毛,作颈静脉或颈动脉分离手术,用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管,反复采血。

5、断头采血:操作者左手拇指和食指握住鼠颈部,头朝下,用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部,提起动物,血液即可流入准备好的容器中。

6、心脏采血:将动物麻醉,使其仰位固定,剪去胸前区毛,消毒皮肤,在左侧第3—4肋间选择心博最强处穿刺,血液借心脏跳动的力量进入注射器。亦可在动物麻醉后,切开动物胸腔,直视心脏内抽血或剪破心脏,直接用注射器、吸管等吸血。

2、豚鼠的采血 目的

了解并熟悉豚鼠的采血方法; 用品

刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、20%的柠檬酸钠溶液、纱布、脱脂棉。

方法与步骤:

1、耳缘切口采血:先将豚鼠耳消毒,用刀片割破耳缘,在切口边缘涂上20%的柠檬酸钠溶液,防止血凝,则血可自切口处流出。此法采血每次可采0.5ml左右。

2、背中足静脉采血:固定豚鼠,将其右或左后肢膝关节伸直,脚背消毒,找出背中足静脉,左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手将注射针刺入静脉,拔针后立即出血。采血后用纱布或脱脂棉压迫止血。

3、心脏采血:选心跳最明显的部位把注射针刺入心脏,血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应细长些,以免发生采血后穿刺孔出血。

3、家兔的采血 目的 了解并熟悉家兔的采血方法; 掌握家兔的耳缘静脉采血方法。用品

常用手术器械、玻璃取血管、计数板、注射器、显微镜。内容

1、耳缘静脉采血:将兔固定,拔去耳缘静脉局部的被毛,消毒,用手指轻弹兔耳,使静脉扩张,用针头刺耳缘静脉末端,血液即流出。本法为兔最常用的采血方法,可多次重复使用。

2、耳中央动脉采血:在兔耳中央有一条较粗的、颜色较鲜红的中央动脉。用左手固定兔耳,右手持注射器,在中央动脉的末端,沿着与动脉平行的向心方向刺入动脉,即可见血液进入针管。由于兔耳中央动脉容易痉挛,故抽血前必须让兔耳充分充血,采血时动作要迅速。采血所用针头不要太细,一般用6号针头,针刺部位从中央动脉末端开始,不要在近耳根部采血。

3、颈静脉采血:将家兔麻醉,剪去一侧颈部外侧被毛,作颈静脉或颈动脉分离手术,用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管,反复采血。

4、心脏采血:穿刺部位在第三肋间胸骨左缘1mm处,选心跳最明显的部位把注射针刺入心脏,血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应细长些,以免发生采血后穿刺孔出血。

4、小白鼠RBC、WBC计数 目的

1、复习小白鼠眼眶后静脉丛采血;

2、学习微量采血法和红、白细胞计数法。原理

用加有抗凝剂的溶液将定量的血液稀释,滴入血细胞计数室内,于显微镜下计数,求出一定容积的稀释血液中的RBC、WBC数,再将其换算成1L血液中的RBC、WBC个数。用品

血细胞计数板、计数器、显微镜、微量吸血管、酒精棉球、消毒脱脂棉球、RBC稀释液(0.9%NaCl溶液)或RBC稀释液:NaCl(维持渗透压)0.5g,Na2SO4(使溶液比重增加,红细胞均匀分布不易下沉)2.5g,HgCl2(固定红细胞并防腐)0.25g,蒸馏水加至100ml。

WBC稀释液,其成分为:冰醋酸1ml(破坏红细胞),1%龙胆紫1ml(染白细胞核,便于计数),加蒸馏水至100ml。方法与步骤

1、熟悉血细胞计数板和微量吸血管的构造

(1)计数板是一块厚厚的长方形玻璃板,板的中部有四条直槽,内侧两槽中间有一条横槽,把中部隔成两个长方型的平台。此平台比整个玻璃板的平台低0.1mm,当放上盖玻片后,平台与盖玻片之间的高度为0.1mm,平台中部有3mm×3mm精确划分的9个大方格,称为计数室,每个大方格的面积为1mm×1mm=1mm2, 体积为0.1mm3。中央的大方格则由双线精确划分为25个中方格,每个中方格的面积为0.2mm×0.2mm=0.04mm2,体积为0.004mm3,每个中方格又用单线精确划分成16个小方格。适用于RBC计数。

(2)微量吸血管 一次性玻璃细管,以防交叉感染。该管长12cm,在4.5cm处和9cm处各有一定量标记,分别10μl和20μl。在11cm处有一色标,为连 结橡胶吸头的标记。

2、微量采血和稀释

(1)先准确吸取3.98mlRBC稀释液于一洁净的试管内。

(2)手持微量吸血管,将其管口浸入血滴,缓缓吸入血液至20μl处,如吸入血液稍过量,可用手指或干棉球轻触管口,缓缓转动,可使血液吸出,至恰好与刻度相符。用干棉球将管口外面的血液擦拭干净。将血液加入到准备好的RBC稀释液中。注意,应将采血管垂直插入稀释液底部,缓缓挤出血液使之不扩散,轻吸上清液再挤出,使血液完全转入到试管中。

(3)将血液和稀释液混匀。

3、充液

取洁净计数板及盖玻片,将盖玻片平放在计数板的计数室上。用干净吸血管或小吸管吸少量混匀的RBC稀释液,然后将管口斜置于盖玻片边缘的计数板毛玻璃斜面上,挤出少量稀释液,此时液体即由于毛细管作用而进入计数室内。但须注意,如果计数室内留有气泡或稀释液过多以致溢出室外的凹沟中,都应该洗去,再重新充液。

4、计数

充液后应让计数板静置8min,待RBC充分下沉后方可进行计数。先在低倍显微镜下观察RBC分布是否均匀,如果分布很不均匀,应洗去重做。在低倍镜下找到中央大方格,看清其横、竖线后即可用高倍镜来计数。显微镜的光圈应缩小并降低聚光器使得视野较暗,这样RBC的轮廓可更清楚些。通常选择中央大方格四角的4个中格和中央的1个中格来计数。计数为了防止遗漏,应按一定的顺序:即第一行先从左向右数到最后一格,下一行则从右向左数,以此类推。对于分布在双线上的RBC,则可计数左侧和上方线上的RBC,即按照“数上不数下,数左不数右”的原则。计数时应将每个中格的RBC数记录下来,若发现各中格之间的RBC数相差超过15个时,表示其分布不均匀,应将计数室洗净,重新摇匀吸管中的稀释血液,再充液进行计数。

5、计算

RBC的稀释倍数为200倍:(0.02ml+3.98ml)/0.02ml=200 计数室5个中格的总容积为0.02mm3,设5个中格RBC总数为X,则1mm3稀释液RBC总数为X×50个。由此可知,每毫升血液中实际RBC数目:X×50×200个,即10000X,再乘以106得出每升血液中的RBC数。WBC基本与RBC相同,不同之处:

1、WBC稀释液,其成分为:冰醋酸1ml(破坏红细胞),1%龙胆紫1ml(染白细胞核,便于计数),加蒸馏水至100ml。

2、计数板四角的四个大方格又各分为16个中方格,适用于WBC计数。

3、吸取WBC稀释液为0.38ml,血液稀释了20倍。

4、在计数WBC时,计数四角的4个大方格中的WBC总数。其总容积为0.4mm3,换算成每升血液中的WBC数时,4个大方格内WBC数×2.5×20×106=WBC数/L。

5、计数时,如发现大方格之间的WBC数相差超过10个时,表示WBC分布不均匀,应重新充液计数。思考题:

1、在实际操作中,你认为哪种采血方法效果好?为什么?

2、小结在操作过程中,哪些因素可能影响计数的准确性? 实验

三、常用实验动物的给药、胰岛素惊厥

1、小白鼠的给药 目的:

1、了解并熟悉小白鼠、豚鼠、家兔的给药方法;

2、掌握小白鼠的皮下注射、腹腔注射。

3、了解胰岛素调节血糖水平的机能。

用品:小鼠专用灌胃针、注射器、75%酒精棉球。

内容:

1.灌胃给药

小鼠专用灌胃针由注射器和喂管组成,喂管长约1nm,喂管尖端焊有一金属小圆球,金属球中空,用途是防止喂管插入时造成损伤。金属球弯成20度角,以适应口腔与食道之间弯曲。将喂管插头紧紧连接在注射器的接口上,吸入定量的药液;左手捉住小鼠,右手拿起准备好的注射器。将喂管针头尖端防放进小鼠口咽部,顺咽后壁轻轻往下推,喂管会顺着食管滑入小鼠的胃,插入深度约3cm。用中指与拇指捏住针筒,食指按着针竿的头慢慢往下压,即可将注射器忠的药液灌入小鼠的胃中。在插入过程中如遇到阻力或可看见1/3的针管,则江喂管取出重新插入,因为这时灌胃并没有插入胃中。

2.注射给药

(1)皮下注射给药

皮下注射给药是将药液推入皮下结缔组织,经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环的过程。作皮下注射常选项背或大腿内侧的皮肤。操作时,常规消毒注射部位皮肤,然后将皮肤提起,注射针头取一钝角角度刺入皮下,把针头轻轻向左右摆动,易摆动则表示已刺入皮下,再轻轻抽吸,如无回血,可缓慢地将药物注入皮下。拔针时左手拇、食指捏住进针部位片刻,以防止药物外漏。注射量约为0.1-0.3ml/10g体重。

(2)皮内注射给药

是将药液注入皮肤的表皮和真皮之间,观察皮肤血管的通透性变化或皮内反应,接种、过敏实验等一般作皮内注射。先将注射部位的被毛剪掉,局部常规消毒,左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧,在两指之间,用结核菌素注射器连接4.5针头穿刺,针头进入皮肤浅层,再向上挑起并梢刺入,将药液注入皮内。注射后皮肤出现一白色小皮丘,而皮肤上的毛孔极为明显。注射量为0.1ml/次。

(3)肌肉注射给药

小鼠体积小,肌肉少,很少采用肌肉注射。当给小鼠注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时,采用肌肉注射。操作时1人保定小鼠,另一人用左手抓住小鼠的1条后肢,右手拿注射器。将注射器与半腱肌呈60°角迅速插入1/4,注入药液。用药量:不超过0.1ml/10g体重。

(4)静脉注射给药

将小鼠放在金属笼或鼠夹中,通过金属笼或鼠夹的孔拉出尾巴,用左手抓住小鼠尾巴中部,小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉,2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面,3条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉。拔去沿尾部静脉走向的毛,置尾巴于45-50℃温水中浸泡几分钟或用75%酒精棉球反复擦拭尾部,以达到消毒和使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的。当尾部静脉注射时,以左手拇指和食指捏住鼠尾两恻,使静脉更为充盈,用中指从下面托起尾巴,以无名指夹住尾巴的末梢,右手持4号针头注射器,使针头与静脉平行(小于30° 角),从尾巴的下1/4处进针,开始注入药物时应缓慢,仔细观察,如果无阻力,无白色皮丘出现,说明已刺入血管,可正式注入药物。有的实验需连日反复尾静脉注射给药,注射部位应尽可能从尾端开始,按次序向尾根部移动,更换血管位置注射给药。注射量为0.05-0.1ml/10g体重。拔出针头后,用拇指按住注射部位轻压1-2min,防止出血。

(5)腹腔注射

左手提起并固定小鼠,使鼠腹部朝上,鼠头略低于尾部,右手持注射器将针头在下腹部近腹白线的两侧进行穿刺,针头刺入皮肤后进针3nm左右,接着使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌,穿过腹肌进入腹膜腔,当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失。固定针头,保持针尖不动,回抽针栓,如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。注射量为0.1-0.2ml/10g体重。

2、豚鼠的给药

1)皮下注射给药

皮下注射部位取颈背、腋下、侧腹或豚鼠后大腿的内侧,注射时以左手拇指和食指提起豚鼠皮肤,将连有5(1/2)号针头的注射器刺入皮下。

2)肌肉注射给药

选用大腿外侧肌肉进行注射。操作时1人保定豚鼠,另一人用左手抓住豚鼠的1条后肢,右手拿注射器。将注射器与半腱肌呈60°角迅速插入1/4,注入药液。用药量:不超过0.1ml/10g体重。

3、家兔的给药

1)静脉注射 兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动脉,耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定,故不用。外缘静脉表浅易固定,常用。先拔去注射部位的被毛,用手指弹动或轻揉兔耳,使静脉充盈,左手食指和中指夹住静脉的近端,拇指绷紧静脉的远端,无名指及小指垫在下面,右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入,移动拇指于针头上以固定针头,放开食指和中指,将药液注入,然后拔出针头,用手压迫针眼片刻。

2)皮下注射 注射时以左手拇指和食指提起皮肤,将连有5(1/2)号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧,豚鼠在后大腿的内侧或小腹部;大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。

3)肌肉注射

肌肉注射应选肌肉发达,无大血管通过的部位,一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉,回抽针栓如无回血,即可进行注射。

4)腹腔注射

用家兔做实验时,进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。

小白鼠胰岛素惊厥

基本原理

胰岛素是调节机体血糖的激素之一,当体内胰岛素含量增高时,便引起血糖下降,动物出现惊厥现象。动物与器材

小白鼠数只、1ml注射器、鼠笼、胰岛素溶液(2μ/ml)、50%葡萄糖溶液、酸性生理盐水。方法与步骤

1.取4只小白鼠称重后,分实验组和对照组,每组2只。2.给实验组动物腹腔注射胰岛素溶液(0.1ml/10g体重)。3.给对照组动物腹腔注射等量的酸性生理盐水。4.将两组动物都放在30—37℃的环境中,并记下时间,注意观察并比较两组动物的神态、姿势及活动情况。

5.当动物出现角弓反张、乱滚等惊厥反应时,记下时间,并立即皮下注射葡萄糖溶液(0.1ml/10g体重)。

6.比较对照组动物、注射葡萄糖的动物、以及出现惊厥而未经抢救的动物的活动情况,并分析所得的结果。注意事项

1.动物在实验前必须饥饿18—24h。2.一定要用pH2.5—3.5的酸性生理盐水配制胰岛素溶液。因为胰岛素在酸性环境中才有效应。

3.酸性生理盐水的配制将10ml0.1mol/LHCl加入300ml生理盐水中,调整其pH值在2.5—3.5,如果偏碱,可加入同样浓度的盐酸调整。

4.注射了胰岛素的动物最好放在30—37℃环境中保温,夏天可为室温,冬天则应高些,可到36—37℃。因温度过低,反应出现较慢。思考题

试分析糖尿病产生的原因及治疗方法。

实验

四、实验动物的全身麻醉、损毁小白鼠小脑的效应

1、实验动物的全身麻醉 目的:

了解影响实验动物麻醉的因素; 了解并熟悉实验动物的麻醉方法; 掌握大、小白鼠的吸入麻醉法。原理:

麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。

全身麻醉方法:麻醉药经呼吸道吸入或静脉、肌肉注射,产生中枢神经系统抑制,呈现神志消失,全身不感疼痛,肌肉松弛和反射抑制等现象,这种方法称全身麻醉。其特点为抑制深浅与药物在血液内的浓度有关,当麻醉药从体内排出或在体内代谢破坏后,动物逐渐清醒,不留后遗症。

用品:注射器、乙醚、戊巴比妥钠、硫喷妥钠、氨基甲酸乙酯、内容:实验动物的麻醉是一项复杂系统的工作。正确的麻醉处理,是动物实验成功的有力保障。而麻醉处理不当,会给实验结果带来难以分析的误差。要想获得良好的麻醉效果,除掌握实验动物麻醉的基本知识和技术、遵循科学的麻醉程序外,还应了解影响实验动物麻醉的各种因素,如动物因素、环境因素等。

1、动物因素

1、年龄和体重

动物对药物的反应随年龄的不同而有差异。有人将大鼠、小鼠按年龄分成幼年、成年和老年3组,观察年龄对乙醇、戊烷和二氯乙烷等急性毒性的影响。按LD50及麻醉浓度观察,敏感性显示为幼年>成年>老年。

体重小的动物每单位体重的基础代谢率较大动物高,因此,动物越小,每单位体重所需的麻醉药剂量越大。一些慢性实验,观察时间较长,可选择年幼、体重较小的动物做实验。

2、性别 实验证明,不同性别的动物对同一药物的敏感性不同,对各种刺激的反应也不尽一致,雌性动物性周期不同阶段和怀孕、授乳时的机体反应性有较大的改变,因此,一般情况优先选雄性动物或雌雄各半做实验。

3、生理和健康状况 体瘦、肌肉发达的动物较脂肪多的动物所需麻醉药量大,这是因为相对非代谢组织,其基础代谢率较低。活动可增加代谢率,因此,好动的动物所需的麻醉量大。身体状况差的动物,所需麻醉药量小耐受性降低。易发生中毒现象。

4、动物饲养

保证足够的营养供应是维持动物健康的重要因素,其中饲料对动物的关系更为密切。动物的生长、发育、繁殖、抵御疾病的能力及一切生命活动都依赖于营养丰富的饲料。动物在麻醉之前一周应提前到位,给于精心的饲养管理,使其处于良好的健康状态。

2、环境因素

1、温度

在一定范围内,温度缓慢的变化,机体可以进行自动调节与之相适应。但变化莫测过大或过急,对机体将产生行为和生理等不良影响。因此,实验环境温度过高或过低都能导致机体抵抗力下降,对麻醉药物的敏感性升高,易发生中毒现象。因此影响麻醉效果。

2、湿度;

3、空气的流速和清洁度 方法:

1.吸入麻醉法 麻醉药以蒸气或气体状态经呼吸道吸入而产生麻醉者,称吸入麻醉,常用乙醚作麻醉药。吸入法对多数动物有良好的麻醉效果,其优点是易于调节麻醉的深度和较快的终止麻醉,缺点是中、小型动物较适用,对大型动物如狗的吸入麻醉操作复杂,通常不用。

具体方法是:使用乙醚麻醉兔及大小鼠时,可将动物放入玻璃麻醉箱内,把装有浸润乙醚棉球的小烧杯放入麻醉箱,然后观察动物。开始动物自主活动,不久动物出现异常兴奋,不停地挣扎,随后排出大小便。渐渐地动物由兴奋转为抑制,倒下不动,呼吸变慢。如动物四肢紧张度明显减低,角膜反射迟钝,皮肤痛觉消失,则表示动物已进入麻醉,可行手术和操作。在实验过程中应随时观察动物的变化,必要时把乙醚烧杯放在动物鼻部,以维持麻醉的时间与深度。2.注射麻醉法 常用的麻醉药有戊巴比妥钠、硫喷妥钠、氨基甲酸乙酯等。大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法进行全身麻醉。狗、兔等动物既可腹腔注射给药,也可静脉注射给药。在麻醉兴奋期出现时,动物挣扎不安,为防止注射针滑脱,常用吸入麻醉法进行诱导,待动物安静后再行腹腔或静脉穿刺给药麻醉。在注射麻醉药物时,先用麻醉药总量的三分之二,密切观察动物生命体征的变化,如已达到所需麻醉的程度,余下的麻醉药则不用,避免麻醉过深抑制延脑呼吸中枢导致动物死亡。注意事项

1、麻醉剂的用量,除参照一般标准外,还应考虑个体对药物的耐受性不同,而且体重与所需剂量的关系也并不是绝对成正比的。一般说,衰弱和过胖的动物,其单位体重所需剂量较小,在使用麻醉剂过程中,随时检查动物的反应情况,尤其是采用静脉注射,绝不可将按体重计算出的用量匆忙进行注射。

2、动物在麻醉期体温容易下降,要采取保温措施。

3、静脉注射必须缓慢,同时观察肌肉紧张、角膜反射和对皮肤夹捏的反应,当这些活动明显减弱或消失时,应立即停止注射。配制的药液浓度要适中不可过高,以免麻醉过急;但也不能过低,以减少注入溶液的体积。

4、作慢性实验时,在寒冷冬季,麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平。思考题

小结在操作过程中,哪些因素可能影响实验动物麻醉效果?

常用的麻醉剂

动物实验中常用的麻醉剂分为三类,即挥发性麻醉剂、非挥发性麻醉剂和中药麻醉剂。1.挥发性麻醉剂 这类麻药包括乙醚、氯仿等。乙醚是常用的吸入麻醉剂,乙醚挥发性很强,有特殊的气味,为易燃品,适用于各种动物(鸡除外),乙醚的作用是抑制中枢神经系统。其特点是安全范围大,肌肉能完全松弛,对肝和肾的毒性较小,麻醉的诱导期和苏醒较短,动物麻醉深度容易掌握,而且麻醉后苏醒较快。其副作用是对呼吸道和结膜刺激性强,胃肠道反应增高,局部刺激作用大,可引起上呼吸道黏膜液体分泌增多,易发生呼吸道阻塞,使用时应小心。2.非挥发性麻醉剂 这类麻醉剂种类较多,包括苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物,氨基酸乙脂和水合氯醛。这些麻醉剂使用方便,一次给药可维持较长的麻醉时间,麻醉过程较平稳,动物无明显挣扎现象。但缺点是苏醒较慢。(1)戊巴比妥钠:为中效巴比妥类药物。戊巴比妥钠,是常用的麻醉剂,有兽用、人兽共用的产品,使用时应注意药品质量。(2)硫喷妥钠:硫喷妥钠为超速效巴比妥类药物,为淡黄色粉末,有硫臭,易吸水,装在安瓶中保存。其水溶液不稳定,故必须临时配制,常配浓度为1%~5%,在0~4℃冰箱中保存,置7天之内,其分解甚微;在室温中则只能保存24h。如见溶液色呈深黄、混浊,即表示已分解,不能使用。该药麻醉诱导和苏醒时间短,一次用药仅可维持数分钟。因此,一般用作为诱导麻醉或基础麻醉。其副作用:对呼吸系统有明显的抑制作用,不宜与吗啡合用。(3)氯胺酮:为中效巴比妥药物,常用其盐酸盐。静脉或肌肉给药后,很快起到麻醉作用,但维持时间较短,一般仅10~20min。为了延长时间,可重复给药。其副作用是心率加快,血压升高,有时还可引起动物呕吐等。(4)水合氯 11 醛:此药为无色透明棱状结晶,有穿透性的臭气及腐蚀性苦味。其溶解度较小,常配浓度为5%~10%。配制后的溶液易沉淀,用时先在水浴锅中适量加热,促其融解。作用特点与巴比妥类药物相似,似一种安全有效的镇静催眠药,能起到全身麻醉作用,其麻醉量与中毒量很接近,故安全范围小,使用时应注意。其副作用为对皮肤和粘膜有较强的刺激作用。(5)氨基甲酸乙酯(乌拉坦):此药是比较温和的麻醉药,安全度大。多数实验动物都可使用,更使用于小动物。一般用作基础麻醉,如实验全部过程都用此药麻醉时,动物保温尤为重要。使用时常配成20%~25%水溶液,犬、猫、兔直肠灌注1.5g/kg体重;皮下、静脉、腹腔注射0.75~1g/kg体重。当与水合氯醛按1:1比例合并麻醉时,效果更好。但在作静脉注射时必须溶在生理盐水中,配成5%或10%的溶液,即每千克体重注射10~20ml。蛙类:2g/kg体重,由背部淋巴囊注射。鸟类:1.25g/kg体重,由肌肉注入。鼠:1.5~2g/kg体重,由腹腔注射。(6)异戊巴比妥钠:常配成5%~10%的水溶液,作用和戊巴比妥钠相似。使用剂量和方法:犬、猫、兔腹腔和肌肉注射80~100mg/kg体重;静脉注射40~50mg/kg体重;直肠灌注100mg/kg体重。鼠:腹腔注射100mg/kg体重。3.中药麻醉剂 动物实验时有时也用到象洋金花和氢溴酸东莨菪菅碱等中药麻醉剂,但由于其作用不够稳定,而且常需加佐剂麻醉效果才能理想,故在使用过程中不能得及普及,因而,多数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。

2、豚鼠的局部麻醉 目的

1、了解并熟悉豚鼠的局部麻醉方法

2、掌握局部浸润麻醉方法。用品

刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、普鲁卡因、利多卡因。原理

用局部麻醉药阻滞周围神经末梢或神经干、神经节、神经丛的冲动传导,产生局部性的麻醉区,称为局部麻醉。其特点是动物保持清醒,对重要器官功能干扰轻微,麻醉并发症少,是一种比较安全的麻醉方法。适用于大中型动物各种短时间内的实验。豚鼠对麻醉药物很敏感。内容

1.表面麻醉 利用局部麻醉药的组织穿透作用,透过粘膜,阻滞表面的神经末梢,称表面麻醉。在口腔及鼻腔粘膜、眼结膜、尿道等部位手术时,常把麻醉药涂敷、滴入、喷于表面上,或尿道灌注给药,使之麻醉。

2.局部浸润麻醉:沿手术切口逐层注射麻醉药,靠药液的张力弥散,浸入组织,麻醉感觉神经末梢,称局部浸润麻醉。常用药为普鲁卡因。在施行局部浸 润麻醉时,先固定好动物,用0.5~1%盐酸普鲁卡因皮内注射,使局部皮肤表面呈现一桔皮样隆起,称皮丘,然后从皮丘进针,向皮下分层注射,在扩大浸润范围时,针尖应从已浸润过的部位刺入,直至要求麻醉区域的皮肤都浸润为止。每次注射时,必须先抽注射器,以免将麻醉药注入血管内引起中毒反应。3.区域阻滞麻醉:在手术区四周和底部注射麻醉药阻断疼痛的向心传导,称区域阻断麻醉。常用药为普鲁卡因。

4.神经干(丛)阻滞麻醉:在神经干(丛)的周围注射麻醉药,阻滞其传导,使其所支配的区域无疼痛,称神经干(丛)阻滞麻醉。常用药为利多卡因。

3、损毁小白鼠小脑的效应 目的:

1、掌握小白鼠的麻醉方法;

2、了解小脑的机能。基本原理

小脑具有维持身体平衡,调节肌紧张和协调肌肉运动等机能。当小脑损伤后,随着破坏程度的不同,可表现出不同程度的肌紧张失调及平衡失调。动物与器材

小白鼠、常用手术器械、大头针、麻醉口罩、乙醚、棉花。方法与步骤

1.用乙醚麻醉小鼠(注意仔细观察呼吸,若呼吸变慢时则表示动物已麻醉)。2.自头顶部至耳后沿正中线剪开皮肤,将颈肌向下剥离。透过透明的颅骨即可看清小脑的位置(图9-6)用大头针刺穿颅骨,直达小脑(2—3mm),搅毁该侧小脑(注意不可深刺,以免损伤脑干)。

3.待小鼠清醒后,可见其向一侧旋转或翻滚。如损伤较轻,小鼠向健侧旋转;当损伤重时,则向损伤侧翻滚。

4.将实验用完的小鼠拉断颈椎处死后弃之。思考题

根据实验结果说明小脑的生理机能。

实验

五、家兔的热原实验

目的

1、练习家兔的各种注射方法;

2、了解家兔热源反应的基本原理。原理

家兔体温变化十分灵敏,最易产生发热反应,发热反应典型、恒定,因此常选用家兔进行这方面的研究。方法与步骤

1、用体温计测量实验前家兔的正常体温。

2、采用以下方法进行热源实验:给家兔静脉注射伤寒一副伤寒四联菌苗0.5~2.0ml/kg,菌苗含量应不低于100亿/ml;皮下注射2%二硝基酚溶液(30毫克)15~20分钟后开始发热;肌注10%蛋白胨1.0g/Kg;皮下注射消毒脱脂牛奶3~5ml。

3、一至两小时后,用体温计再次测量家兔的体温,看其有何变化。思考题

在热源实验操作过程中,你认为应注意哪些方面?

实验

六、动物体内常见寄生虫卵检查

目的

1、学习常见实验动物虫卵标本的采集和检查方法。

2、学会对不同虫卵进行鉴定。用品

大鼠、小鼠、猕猴的粪便、示范片、盖玻片、载玻片、目镜测微尺、物镜测微尺 方法

1、直接涂片法

包括粪便、血液、肠内容物等直接涂片检查。取一载玻片,在其上加一滴生理盐水,取少许粪便或肠内容物与生理盐水混匀后于显微镜下观察。血液可直接滴于载玻片上,制成涂片,加盖玻片观察。

2、虫卵收集法

a.沉淀集卵法:取粪便加适量清水,混匀后过滤,重复数次至液体清亮为止,静止沉淀十分钟后,取底部沉淀物作镜检。此法适于检查血吸虫卵。

b.饱和盐水漂浮法:利用虫卵的比重小于饱和盐水的原理,使线虫卵和几种绦虫卵或包囊漂浮于液面上,提高检查效果。实验步骤和内容:

1、自然感染蠕虫的调查

取猕猴粪便在盛有生理盐水的培养皿中漂洗,直接查找寄生虫虫体和虫卵,根据虫体和虫卵的形态,签别虫种。

2、直接涂片法或沉淀集卵法检查寄生虫卵。

3、观察蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵标本装片。

注意:观察各种虫卵的大小、形状、颜色、卵膜结构等以及各种虫卵的特征

A、蛔虫卵(线虫纲一虫体线形或长圆柱形,雌雄异体)受精卵为椭圆形,大小约40-60微米(35-50×45-76),卵壳的表面有一层凸凹不平的蛋白质膜,被胆汁染成棕黄色,整个虫卵呈棕黄色。卵壳厚而透明。卵内有一近圆形的卵细胞。

未受精卵多为长椭圆形,大小约40一60微米(39-40×88-94),卵壳与蛋白质膜较薄,卵内充满大小不等的屈光颗粒。

无论受精卵和未受精卵其蛋白质膜有时缺失,无蛋白质膜的受精卵是无色透明,请注意与其它虫卵的区别。

B、蛲虫(线虫纲:虫体细小,乳白色,似一白色线头。)虫卵为椭圆形,两侧不对称,一侧扁平,一侧稍凸。大小约25-55微米(20-30×50-60),卵壳较厚,无色透明,内含幼虫。

C、绦虫(绦虫纲:腹背扁平、带状、分节,雌雄同体,常见的有链状带绦虫。)虫卵近球形,较小,大小约45-70微米,虫卵自孕节排出时卵壳己脱落,镜下所见是具胚膜的六钩蚴,胚膜较厚,棕黄色有放射状的条纹。

D、血吸虫(吸虫纲一多有腹背扁平,舌状或叶状,有吸盘,雌雄异体,常见的有日本血吸虫等。)虫卵为椭圆形,淡黄色。大小约74-106×55-80微米,卵壳较薄无盖,壳 的一侧有小棘,一般在镜下不易见到。成熟的卵内含有一个毛蚴。注意事项

1.高倍镜下观察必须加盖玻片;

2.采用直接涂片法时,不要涂得太多,必须分散开,均匀; 3.观察寄生虫卵前,需在高倍镜下校对目镜每格的长度,才能算出虫卵大小; 4.先在低倍镜下观察,发现后换为高倍镜。实验报告内容

1、绘出镜下观察到的蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵。

2、概括总结蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵的形态区别要点。

3、在整过操作过程中的注意事项。

实验

七、雌性小鼠动情周期的检查

目的

1、学习小鼠阴道内液体的采集方法;

2、了解在动情周期的不同阶段,小鼠阴道涂片的组织学变化。原理

哺乳类的雌性动物在性成熟后,出现动情周期变化,其中啮齿类动物在动情周期不同阶段,阴道粘膜发生比较典型的变化。因此,根椐阴道涂片的细胞学改变,可以推断卵巢功能的周期性变化。

未成熟的大、小白鼠尚无自然的动情周期,但当注射绒毛膜促性腺激素后,则可使其提前出现。用品

显微镜、棉签、载玻片、生理盐水、碱性美蓝溶液(配制:美蓝0.3g,溶于95%的乙醇30ml中,再加蒸馏水至100ml及10%NaOH溶液0.1ml)等。动物

性成熟的雌性小白鼠。方法与步骤

1、小鼠阴道内液体取法

取阴道内液体有下列三种方法:

(1)冲洗法 将装有消毒生理盐水的滴管轻轻插入动物阴道内,按压滴管橡皮头,将生理盐水打入阴道,然后吸出,如此2-3次。最后将滴管中的阴道冲洗液滴在载玻片上。

(2)沾取法 将消毒的细棉签用生理盐水润湿,轻轻插入动物阴道内0.5cm,慢慢转动一下取出。

(3)刮取法 用光滑的玻璃小勺或牛角制 小刮片慢慢插入阴道内,在阴道壁轻轻刮取一点阴道内含物。

2、涂片

将带有阴道内含物的细棉签等在载玻片上均匀的转动做成涂片,然后将涂片在空气中自然干燥。

3、染色

用碱性美蓝溶液染色5min左右,用蒸馏水冲洗剩余的美蓝溶液(注意:应从涂片边缘慢慢冲洗,切不要把细胞冲洗掉),并使之干燥。

4、观察结果

在显微镜下观察阴道分泌物涂片的组织学变化,确定动情周期变化的不同阶 段。

阶段

表 小白鼠性周期阴道分泌物涂片变化 持续时卵巢变化 涂片可见 间/h 卵泡加速大量有核上皮细胞,少量角化

生长 细胞

卵泡成熟、满视野角化上皮细胞,少量有

排卵 核上皮细胞

黄体生成 角化上皮细胞及白细胞 动情前期

动情期

动情后期

动情 黄体退化 大量白细胞及少量黏液 间期

注意事项:

1.采取阴道(下口)内分泌物,不是肠道内容物(上口); 2.制作涂片要均匀;

3.自然干燥后,再染色8-10min;

4.用蒸馏水冲洗剩余的美蓝溶液时,应从涂片边缘慢慢冲洗; 5.在镜下镜检(如用高倍镜,必须加盖玻片)。

实验

八、小鼠下颌骨形态分析

目的与原理

小鼠的下颌骨形态有高度的遗传稳定性,不同品种或品系小鼠下颌骨的形态、大小不同,因此该项技术可以作为纯系小鼠、纯系大鼠遗传质量的检测方法之一。下颌骨形态分析是一种定量技术。可阐明许多遗传学差异。主要是对小鼠或大鼠右侧下颌骨形态做对比分析,通过多变量分析,建立判别函数进行性别判别。

常规标本制备方法

1.随机抽取小鼠数只(60日龄,体重相当)处死,取下头颅。

2.投入沸水中煮约10分钟,冷却后把头颅上的组织仔细剔除,放在含有木瓜蛋白酶的自来水中(下颌骨带的残肉与酶的比例为1:25),水的PH为4.5,消化温度为40—60℃,最适温度为52 ℃,保温过夜,取出下颌骨,用小镊子去掉残肉和门齿,再用水洗净。

3.自然干燥,存放于塑料袋中。

4.制作坐标底片,用于测量下颌骨有关变量。

5.在坐标底片上用两个平直的玻璃细条粘成直角,成L型,与坐标的纵轴和横轴相吻合,压平待用。动物

小白鼠 方法与步骤

1.下颌骨的11个测量点参见下图。

2.将待测标本平放在解剖镜载物台的标尺上,下颌骨前端和下部边缘与标尺上的L型玻璃条的X及Y轴分别贴紧放平,将每个标本11个变量的结果记录下来,交给老师,统一处理。

3、打开SPSS,输入数据;定义变量;

4、操作步骤:Analyze→Classify →Discriminant →open discriminant analyze;Gender →grouping variables(define range);all variables →independent;Method →enter independent together;open statistics →function coefficients →Fisher’s,unstandardized →continue;open classify →display→summary table,casewise results;prior probabilities →All groups equal → continue →OK。结果分析:求出判别系数和判别函数;

2、得到判别代结果和判别率;

3、验证回代和新标本判别。注意事项

1、标本要保证完整性;

2、小白鼠雌雄的体重要分别相近;

3、突变性的标本要舍去;

4、测量要注意准确;

5、每组标本的性别,不要混淆。

实验

九、家兔的神经分离、气管插管

目的

1、学习气管插管术;

2、学习分离及识别有关的血管和神经;

3、学习测定家兔呼吸运动的方法。用品

常用手术器械、气体插管、玻璃分针、刺激器、张力换能器、铁夹台、25%氨基甲酸乙酯、3%乳酸。动物

家兔 方法与步骤

1、麻醉并固定动物

每组取家兔一只,称重,按40mg/kg体重的剂量由耳缘静脉缓慢注射戊巴比妥钠溶液,将动物麻醉。当动物四肢松软,呼吸变深变慢,角膜反射迟钝时,表明动物己被麻醉,即可停止注射。将麻醉动物仰卧于兔体手术台上,固定好头部和四肢,将兔舌拉出以免阻塞呼吸道。注意:缓慢注射;兔舌拉出;颈部必须放正拉直。

2、颈部手术

用剪毛剪剪去颈部被毛,用手术刀切开颈部皮肤(5-7cm)长,分离皮下结缔组织和肌肉,暴露气管,分离气管和食管,在气管下穿一棉线备用。

3、颈部神经及血管分离术

3.1 颈总动脉的分离 在颈部,神经与颈总动脉被结缔组织膜束在一起,形成血管神经束,位于气管的外侧,其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌所覆盖。用玻璃分针将气管两侧上述肌肉分离后,用左手拇指和食指轻轻捏住分离的左侧肌肉和皮肤,稍向外翻,即可将血管神经束翻于食指之上。然后用玻璃分针分离颈总动脉外的结缔组织膜,将动脉分离约4cm长,并向头端追索到甲状软骨上缘,暴露颈动脉窦,在颈动脉下穿一棉线。用同样的方法可分离右侧颈总动脉。3.2 颈部神 经的分离 轻轻提起左侧颈总动脉下的线,即可清楚看到三条粗细不同的神经。其中迷走神经最粗,呈白色,一般位于外侧,易于识别;交感神经较细,略呈灰色,一般位于内侧;减压神经最细,呈白色,一般位于迷走神经和交感神经之间。

由于家兔品种不同及个体间的差异,三条神经的位置有较大的变异,应注意识别。识别准确后,用玻璃分针顺着神经的方向,小心分离其外的结缔组织膜,-般先分离减压神经,然后再分离交感神经和迷走神经,并分别在各神经下穿不同颜色的线(双线)备用。

4、气管切开术

在喉头下2-3cm处的气管上作一“T”型切口,将与气管口径相近的气管插管向心方向插入气管中,用线结扎,并将余线固定于气管插管的分叉处,以防气管插管脱落。

5、腹部手术

剪去剑突部位腹部被毛,切开胸骨下端剑突部位的皮肤,并沿腹白线再切开长约2cm的切口。细心分离剑突软骨并结扎,线的另一端连于张力换能器上,张力换能器连接于计算机BL-410的 1 通道上。

6、开机→BL-410生物机能实验系统→实验项目→呼吸实验→呼吸运动调节 这时可看到在屏幕上显示4个波形窗口,鼠标左双击1通道窗口,即只显示出1通道波形窗口,在屏幕右下角选实验标记。鼠标点开始即可描记呼吸运动曲线。

7、观察项目

7.1 慢速记录正常的呼吸运动曲线,注意分清吸气与呼气时的曲线方向; 7.2 增加无效腔对呼吸运动的影响 将橡皮管(长约lm,内径0.7cm)连于气管插管的一个侧管上,用止血钳夹闭另一侧管,使无效腔增加,观察并记录呼吸运动的变化。当呼吸运动出现明显改变后立即去掉橡皮管使呼吸运动恢复正常;

7.3 窒息对呼吸运动的影响 将气管插管的两个侧管同时夹闭,观察并记录呼吸运动的变化;

7.4 血中酸性物质增多的效应 取5ml注射器,由耳缘静脉较快地注入3%乳酸溶液2m1,观察呼吸运动的变化;

7.5 分别刺激迷走神经中枢端和外周端,观察并记录呼吸运动。注意事项

1、实验过程中,要防止动脉套管刺破颈总动脉和发生凝血现象;

2、剪去一段剑突软骨时,不能剪得过深,以免伤及其下附着的膈肌,并要保证剑突软骨与胸骨完全分离;

3、在分离神经及穿线时,切勿损伤与其伴行的神经;

4、在颈总动脉近甲状腺处有甲状腺前动脉,分离时应稍靠下方,以免损伤;

5、注射要缓慢,兔舌要拉出,颈部必须放正拉直。

实验

十、实验动物环境因子检测

目的

1、正确使用环境因子检测仪器;

2、了解噪音计、光度计、温度计、湿度计的测定原理;

3、学习测定方法。内容

测定各种实验动物环境的照度、噪音、温度和湿度。

实验

十一、小白鼠走迷宫

目的

1.通过观察、分析小白鼠学习和记忆过程,理解大脑在动物行为机制建立中的作用。

2.通过实验,了解影响动物学习和记忆能力的因素。

3.通过实验,了解数据统计分析在科学研究中的重要作用。实验原理

老鼠接近人类,通过老鼠的实验可以间接地了解人脑的功能。学习和记忆是神经系统高级中枢的重要机能之一。学习是神经系统不断接受环境刺激而获得的行为习惯或经验;获得的行为习惯或经验维持一定时间的能力就是记忆。动物的学习和记忆能力对其生存具有重要意义。

在人为设置的迷宫里,动物通过不断感受复杂通道的结构,调整和改进自己的行为。随着训练次数的增加,条件反射逐渐建立,以至在大脑皮层形成记忆。通过记录动物搜寻食物的时间长短可以对此加以评价。同时也可以考察一些刺激(如饥饿和化学药剂)对记忆力的影响。

实验材料

小白鼠。用品

由学生根据实验需要自行准备。实验步骤

(一)实验准备

1.用硬纸板或木板构建迷宫。高度以小白鼠不能爬上为宜,上面也可以盖上一玻璃板。

1、选择健康活泼的小白鼠5只,要求年龄和体重一致,实验前饥饿一天,但提供水。另选择一只未经饥饿处理的小白鼠备用。在迷宫内特定位置放置一块面包。

(二)实验项目

1.饥饿处理的小白鼠1只,放置在迷宫入口,记录其找到食物所需时间。5分钟后,重复上述步骤,同样的间隔时间对其进行四次实验,每只小白鼠共计进 行5次实验。

2.对其余四只饥饿处理的小白鼠进行5次实验,记录每只小白鼠找到食物所需时间。

3.数据处理 根据实验数据,求出5只小白鼠每次实验找到食物所需时间的平均值。以实验次数为横坐标,找到食物的时间为纵坐标,建立直角坐标系,制作标准曲线。把上述平均值标在坐标纸上并连接各点,从而得到实验数据与寻找时间的关系曲线。观察图形的变化趋势。

4.取未经饥饿处理的小白鼠进行步骤1,把记录的时间与标准曲线进行对比,分析小白鼠记忆力的变化。

5.取1只饥饿处理的小白鼠称重,皮下注射120mg/kgNaNO2,然后让其走迷宫,重复步骤1,将所记录的时间与标准曲线对比,分析小白鼠记忆力的变化。

6.另取1只饥饿处理的小白鼠称重,测试前半小时将小白鼠灌服20%-40%酒精100ml/kg。将所记录的时间与标准曲线进行对比,分析小白鼠记忆力的变化。

7.再取1只饥饿处理的小白鼠静脉注射乙酰胆碱,重复步骤1,将所记录的时间与标准曲线对比,分析小白鼠记忆力的变化

实验改进点

1、实验用年老的小鼠与小白鼠进行对比考察年龄对学习和记忆力的影响。

2、实验考察乙酰胆碱和NaNO2对小白鼠学习和记忆力的影响。

3、实验注意事项

1、选材为活泼健康的小白鼠,不能选运动机能和记忆力差的小白鼠。

2、为了避免嗅觉对测试的影响,做每一个实验项目前都应对迷宫进行清洁。实验分工

和 负责找资料,负责整理和制作,实验改进点由这几人讨论。

实验预期结果

1、随着小白鼠学习和记忆过程的进行,小白鼠找到食物的时间会越来越短。

2、未经饥饿处理的小白鼠由于没有饥饿的刺激,找到食物的时间会更长。

3、由于NaNO2是缺氧剂,会造成脑部缺氧,从而破坏记忆的保持,因此小白鼠找到食物的时间会变长。

4、测试前半小时将小白鼠灌服20%-40%酒精可以明显干扰记忆的再现,因此小白鼠找到食物的时间会变长。

5、小白鼠脑部乙酰胆碱的增加会增强记忆力,因此小白鼠找到食物的时间会变短。思考

1.小白鼠的年龄对学习和记忆有没有影响? 2.人的大脑也和小白鼠有类似的结果吗? 3.乙酰胆碱在该实验中的作用机理是什么?

实验参考资料

《实验动物和动物实验技术》苗明三主编中国医药出版社.北京.1997.6 《动物生物学实验技术》黄诗笺主编高等教育出版社 施普林出版社2001.8:109,131,132 《实验动物学》罗满林、顾为望主编中国农业出版社 2002.8P127-143.实验十二 消化系统疾病动物模型建立及验证(设计)

(一)病毒性肝炎模型

常用方法是注射乙型肝炎病人血清复制乙型肝炎模型。但大部分实验动物对甲型肝炎病毒不易感。我国已有报导红面猕猴、恒河猴、人及野生树鼩种毒后出现人甲型肝炎现象。近年来发现某些鸭肝炎病毒的特征与人肝炎病毒十分相似,故用鸭作为人肝炎模型也开始增多。

(二)免疫性肝炎模型

慢性或迁延性肝炎患者体内存在着抗肝细胞成分抗体。1959年国外有人用肝组织悬液加弗氏佐剂免疫豚鼠,成功地诱发了肝细胞变性及坏死病变。也有人报导肝膜蛋白(LSP)加佐剂分次注射产生动物免疫性肝炎模型。

(三)胃、肠道溃疡模型

在动物身上复制胃、肠道溃疡的方法较多,但所用的方法不同,引起的溃疡病变也各有特点。常用的方法有:

1.应激法 以各种强烈的伤害性刺激(如强迫制动、饥饿、寒冷等),引起动物发生应激性溃疡。如把动物浸入冷水中或放在应激箱中不断地遭受电刺激,使之剧烈不安,一昼夜即能引起胃粘膜出血及溃疡。这种方法简单,成功率达99%以上。

2.药物法 给动物投服或注射一定量的组织胺、胃泌素、肾上腺类固醇、水杨酸盐、血清素、利血平、保泰松等可造成动物胃肠溃疡。如给豚鼠小剂量的组织胺,连续数天,可引起胃、十二指肠、食道等发生溃疡。又如可用利血平、血清紧张素、阿斯匹林等诱发大白鼠或小白鼠的胃溃疡。

3.烧灼法 用电极烧灼胃底部的胃壁,可造成象人的胃溃疡病变;用浓醋酸给大鼠胃壁内注射或涂抹于胃壁浆膜面上可造成慢性溃疡。烧灼法复制胃、肠道溃疡模型的优点是方法简便,溃疡部位可由作者自己选择。

4.结扎幽门法 选用大鼠、小鼠或豚鼠,麻醉后,无菌技术下在剑突下由腹正中切开腹壁皮肤及肌层,切口长约3cm,暴露胃,沿胃向右,辩清幽门和十二指肠的联结处,避开血管,于其下穿线,将幽门完全结扎。术后绝对禁食禁水。幽门结扎后,可刺激胃液分泌并使高酸度胃液在胃中潴留,造成胃溃疡。这类溃疡复制方法简单,发生快,成功率高,但病变较表浅,严格地说仍然属于胃粘膜急性出血性糜烂,与人类胃溃疡的典型病变差距较大,适于作探索抗溃疡病药物研究和胃溃疡发病学方面的研究。

其他还可用外科手术方法从肠道上部排除可中和胃酸的碱性胆汁、胰 液或十二指肠液造成溃疡。还可用刺激、损伤或毁损脑组织等方法造成溃疡。

(四)胰腺炎模型

复制胰腺炎模型可采用使胰液外分泌发生潴留;使各种胰酶在胰管系统内活化;感染或某些微生物毒素的作用,影响胰腺的营养、代谢等。实验动物选用狗、兔和大鼠。将狗自身胆注按0.5ml/kg体重缓慢注入狗胰腺体尾交界处的胰腺实质内,则可引起胰腺局部组织坏死及炎性浸润,与人类急性胰腺炎和病变相似。用大肠杆菌悬液9亿/ml,按1ml/kg体重,向兔胰管内逆进注射可诱发急性胰腺炎。另外也可采用大鼠腹腔内连续注射乙硫胺酸诱发成功胰腺炎模型。随着乙硫胺酸注射时间的延长,胰腺组织可以出现广泛进行性破坏和退化及胰酶水平的持续下降。

(五)糖尿病模型

糖尿病模型的复制方法采用注射致高血糖因子;手术切除胰腺的全部或大部;用四氧嘧啶(Alloxan)破坏胰岛β细胞,造成胰性糖尿病;注射根皮苷使肾小管对糖的再吸收发生障碍并破坏酯酶致使葡萄糖磷酸化过程和脱磷酸过程障碍,引起根皮苷糖皮。

四氧嘧啶复制的糖尿病动物模型是目前研究人类糖尿病较好的方法,其实验性糖尿病近似人类糖尿病,体内代谢障碍时有可能产生此种衍生物,胰岛外分泌部不受损伤,几乎所有常用实验动物都可用来进行实验研究。模型胰岛的β细胞不是功能消失,而是功能不同程度的降低,有利于研究胰岛组织再生和功能恢复,动物不必注射胰岛素即可存活很久。大鼠造型剂量为12mg/100g体重,家兔为150~200mg/kg体重,狗约为50~60mg/kg体重。家兔根皮苷皮糖尿病造型剂量为0.5%根皮苷按15m/kg体重,皮下注射。注意所用四氧嘧啶和根皮苷溶液必须现配现用。

实验

6.实验动物学名词解释总结 篇六

实验动物:经人工培育或人工改造,对其携带的微生物实行控制遗传背景明确,来源清楚,用于科学实验药品生物制品的生产和检定及其他科学实验的动物。试验用动物:指一切可用于实验的动物,分为实验动物、野生动物、经济动物和观赏动

实验动物的标准化是以实验动物为研究对象或应用材料这一学科领域中所涉及的科学、技术、经济、人才及管理等社会实践活动中,对重复性事物和概念,通过制定,实施标准达到统一,以获得最佳秩序和社会效益的过程。

AEIR要素:A、实验动物。E、仪器设备。I、情报信息。R、化学试剂。

遗传:后代在形态、生理、生化等方面的特征与亲代一致性。遗传现象是生物界的一个普遍现象。

动物福利:指动物与人一样,有思维、有情感,应当给与与人一样的生存权。动物福利的实质是保障其不受虐待,并得到合理的照料。

变异:后代与亲代或者兄弟、姐妹间的不一致性。

等位基因:两条同源染色体相同位点上的基因。

复等位基因:在群体中,两条同源染色体相同位点上多种基因组成的基因系列。性染色体:与性别有关的一对染色体,是一对形态、大小、结构有很大差别的染色体。

品系(Strain):是实验动物分类学上专用名词,采用一定的交配方式繁殖且祖先明确的动物群。

伴性遗传:控制某种性状的位于性染色体上,以至这种性状的遗传基因因性别而异。

近交系:经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成,近交系数达到99%,品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先,该品系称为近交系。

近交系动物:又叫纯系动物,是指至少连续经过20代以上全同胞兄妹或亲子交配,品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先的动物群体。

转基因动物:通过实验手段将外源基因稳定地整合至基因组,并能遗传给后代动物。

封闭群:以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群,在不从其外部引入新个体的情况下,至少连续繁殖4代以上,封闭群也称远交群。

杂交群(Hybrids)由不同品系或种群之间杂交产生的后代。

杂交一代动物(F1代):两个不同近交系或种群杂交所生的第一代动物。

突变系:带有突变基因的品系(保持有特殊突变基因的体系)。

F1:两个不同近交系动物杂交所产生的第一代动物,也称为杂交一代动物。遗传概况:是指用各种方法和技术对各种品系的遗传特性进行监测的数据汇总。实验动物按微生物净化程度分为1普通动物、4无菌动物、3无特定病原菌动物spf、2清洁动物 普通动物:概念:经严格的微生物和寄生虫控制,饲养在开放系统中,体内外不带有质量标准规定的主要人畜共患病和动物烈性传染病病原体的动物。

无菌动物:是指机体内外均无任何寄生物(微生物和寄生虫)的动物,此种动物在自然界中并不存在,必须用人为的方法培育出来。饲养在隔离器系统中。无特殊病原体动物:是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,简称SPF动物

清洁动物:指饲养在屏障环境,除普通级动物应排除的病原体外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。

悉生动物又称已知菌动物,是指在隔离系统饲育的,经检测其体内外仅有经人工有计划接种的已知微生物或寄生虫的动物。这类动物是向无菌动物接种一种或几种已知菌而获得的。

裸鼠;裸小鼠(Nude mice):

 指先天无胸腺的小鼠,简称裸小鼠。特点:11号染色体上的裸基因(nu)发生突变,导致出现裸体异常状态。

2个主要缺陷特征: 纯合裸基因的小鼠(nu/nu)临床表现为

毛发缺乏呈裸体外表;

仅有胸腺上皮,使T淋巴细胞不能正常分化,导致细胞免疫功能低下。

细胞活力增强。B细胞功能正常,NK

繁育能力差,乳腺发育缺损,以雄性纯合子与雌性杂合子繁育。

T细胞缺陷可通过移植成熟T细胞、胸腺细胞得到恢复

动物环境:影响动物进化、生态反应和生长的所有外界条件的总和。

环境复合态:环境对实验动物的影响并非仅受单一因素的作用,而是受到诸多因素的复合作用,称之为环境复合态

变态反应:也叫超敏反应,是指机体对某些抗原初次应答后,再次接受抗原刺激时,发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。营养:动物为了维持生命必须从体外摄取必要的物质,经过消化吸收合成机体成分,并将无用的代谢产物排泄到体外,这个生理过程叫做营养。

营养素:从体外摄取的营养物质,包括水、蛋白质及氨基酸、碳水化合物与脂肪、矿物质和维生素

实验动物营养学:是研究饮食物(营养素)与实验动物机体生长、发育、繁殖、健康及试验结果关系的科学

必须氨基酸:动物体内不能合成或合成速度太慢,数量少不能满足动物的生理需

要,必须通过饲料外源提供的氨基酸,称为必须氨基酸。

动物的营养需要量:动物维持生命与健康、生长、繁殖、哺乳等所必需的足够量的营养素,这个必须的营养素量叫动物的营养需要量

全价配合饲料:也叫全日粮配合饲料该饲料含有的各种营养物质和能量均衡,能够完全满足动物的各种营养需要,不需要添加任何其他成分就可以直接饲喂,并能获得最大的经济效益

天然配方:利用试验动物可食用的蛋白原料、能量饲料和青贮饲料,根据实验动物的生理特点进行合理搭配

人工合成配方:按科研课题的某些特定指标、特殊要求而设计的,以验证某一特定营养要素、特定物质在实验动物上的表现

混合配方:根据实验动物的营养需要,利用蛋白原料,能力原料和青贮原料的营养成分进行配比计算,再将不足的营养成分通过添加油脂、氨基酸、维生素等达到实验动物的营养需要

混合饲料:又叫基础饲料,是由能量饲料、蛋白质饲料等按一定配比组成,它基本上可以满足动物需要,但营养不全,还需添加一定量的青、粗饲料。

疾病:动物体内的各种功能活动与外环境密切相关,并保持一定的平衡状态由于某些原因,破坏了这种平衡,动物便表现出某些机能失调或障碍,这种现象称疾病

传染性疾病:病毒,支原体,衣原体,螺旋体,立克次体和某些寄生虫引起,这些致病的病原体侵入到敏感动物机体后,能在特定部位繁殖,引起功能障碍和损伤 人畜共患病:哺乳类实验动物与人的基因结构和功能高度相似,某些疾病容易相互传染,这些能传染给人类的疾病较人畜共患病

生物安全:由于职业和现代生物学技术的发展和应用,造成的对人体健康和生态环境的潜在威胁及应采取的一系列有效的预防和控制措施

生物危害:在生命科学中,由于实验人员的错误操作,而使有害病原体散播到外界,造成环境污染,及周围人和动物感染发病 动物实验设计:是根据实验动物学和数理统计学的原理和方法进行实验设计,确保实验内容安排合理,对实验结果进行高效率的统计学分析,以使用最少数量的实验动物获得相对最优的实验结果和可靠的结论

实验用动物:指一切用于科学实验的动物。

动物实验:为科研、教学、药物检定等目的,对实验动物进行物理、化学、生物等因素处理,观察其反应,获得实验数据,解决科研中问题的过程。近交系及特点;经至少连续20代的全同胞兄妹交配或亲代与子代交配培育而成,品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。

封闭群及特点;以非近亲交配方式繁殖生产的一个实验动物种群,在不从其外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上,称为一个封闭群,或叫远交群。品种与品系;指具有相似的外貌特征,独特的生物学特性以及稳定的遗传性能,共同遗传来源和一定遗传结构的动物群体。

近交系数;指群体中某个个体通过遗传携带两个同源等位基因的概率。

近交衰退;指在近交过程中动物群体由于基因分离和纯合而产生的不利于个体和群体发育的现象。

亚系;育成的近交系在繁育过程中,由于残余杂合基因的分离、基因突变的产生、抽样误差导致部分遗传组成改变而形成遗传差异的近交系动物群体。

支系;由于饲养环境的改变,或对动物进行人为的技术处理,对某些动物特征产生影响,形成不同的支系。

重组近交系;由两个无血缘关系的近交系杂交后得到F2代,分组分别连续20代以上全同胞交配而育成的一组近交系。

.同源突变系(Coisogenic Inbred strain)

定义:两个近交系,除了一个指明位点等位基因不同外,其遗传基因全部相同的品系 重组同类系(Recombinant Congenic Strain)简称RC

定义:由两个近交系杂交后,子代与两个亲代中的一个进行数次回交(通常2次),通过不对特殊基因进行选择的近亲交配而育成的近交系。

.同源导入系(Congenic Inbred Strain)

定义:通过杂交、互交或回交等方式将一个基因导入到近交系中,所形成的新的近交系只在一个很小的染色体片段上的基因不同,也称同类系

系统杂交动物;由不同品系或种群之间杂交产生的后代

转基因动物;指用实验的方法导入的外源基因,在其染色体基因组内稳定整合并可以表达和传给后代的一类动物;整合在动物基因组内的外源基因称为转基因。嵌合体动物;只有部分组织细胞基因组中整合有外源基因的动物,称为嵌合体动物。如果整合的部分组织细胞恰为生殖细胞,也可将外原基因遗传给子代。克隆动物;不经过有性生殖过程,而是通过核移植生产的遗传结构完全相同的动物,称动物克隆。

免疫缺陷动物;免疫缺陷动物(Immunodeficient animal):由于先天性遗传突变或用人工的方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。动物模型

人类疾病动物模型指在医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和材料。包括自发性动物模型和诱发性动物模型。使用动物模型是现代生物医学研究中的一个极为重要的实验方法和手段,通过对动物各种疾病和生命现象的研究,进而推用到人类,有助于更方便,更有效地认识人类疾病的发生、发展规律,从而制定防治措施。

诱发性动物模型:是指使用物理、化学、生物等致病因素作用于动物,造成动物组织、器官或全身一定的损害,出现某些类似人类疾病的功能、代谢或形态性结构方面的病变,即人为地诱发动物产生类似人类疾病的动物模型。

SCID鼠;严重的联合免疫缺陷小鼠(Severe combined immunodeficient mice, SCID)为严重的免疫缺陷疾病,动物临床表现为低γ球蛋白血症、低淋巴细胞血症。裸鼠;裸小鼠(Nude mice): 指先天无胸腺的小鼠,简称裸小鼠。

渗漏现象。少数SCID小鼠的免疫功能可出现极小程度的恢复,把这种现象称为渗漏现象。

杂交优势:杂种一代具有较强的生命力,对疾病的抵抗力强,寿命较长,容易饲养,在很大程度上克服了近交衰退现象的优越性。实验动物设施(Laboratory animal facility)是从事饲养、育种、保种、生产、动物实验等的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。它是由实验动物繁育、生产设施和动物实验设施两部分组成。.普通环境(open condition):该环境设施符合动物居住的基本要求,不能完全控制传染因子,适用于饲养教学等用途的普通实验动物(conventional animal)。.屏障环境(barrier condition):该环境设施适用于饲育清洁实验动物(Clean animal)及无特定病原体实验动物(SPF specific pathogen free animal),该环境严格控制人员、物品和环境空气的进出。

7.实验动物学心得体会 篇七

在传统经典实验基础上增加开放性综合实验, 教学内容更加丰富

传统教学将实验划分为不同操作方式的小单元, 各个实验单元为独立、不相关的操作训练。采用开放性教学方法保留经典的操作学习实验, 并经过重新编排使实验单元形成一个连续的整体实验, 成为要求每个学生完成的基础实验部分。如设置了 (1) 培养基制备及灭菌; (2) 微生物分离纯化; (3) 菌落计数及生化实验; (4) 细菌涂片及革兰氏染色; (5) 水封片及细菌形态观察, 五个单元组成的基础实验。实验单元环环相扣, 通过基础实验的学习, 学生对微生物学的基本实验手段和方法有了初步掌握。完成基础实验后学生自主选择一些与社会生活和经济生活密切相关的课题作为实验题目, 如特殊环境中微生物分布和数量的调查, 微生物对环境的修复作用间考察, 茶叶中微生物的分离与鉴定。这些学科前沿的新内容多数与科学研究和技术革新相关, 把实验教学与科研结合起来, 不仅使学生更加熟练地掌握基本实验方法和技能, 而且了解到微生物学的新进展, 并系统熟悉科学研究的基本过程和获取知识的科学途径。

学生自主设计、全程参与, 锻炼了实验操作能力和科学思维能力

传统教学中教师占主导地位, 学生往往只是不经思考地重复操作。而开放性实验将决定权交给学生, 实验过程的每一步, 包括选题、设计方案、开展实验和分析结果, 都由学生的独立思考、独立操作的结果, 从中培养了学生发现和解决问题的能力, 培养了学生综合能力和创新能力。此外, 开放式实验教学特别注重对实验结果的总结和讨论。强调分析是为了让学生在完成整个实验过程后进行整体的回顾, 回顾提出的假设是如何验证的, 思考每一步的得失, 整理宝贵的经验, 使学生学会分析和思考的方法, 提高学生分析和解决问题的能力。通过开放式教学, 学生不仅进一步掌握了微生物实验基本操作技能, 无菌操作意识也明显加强, 并且学生对知识的理解和思维能力也得到了更好的培养。

以学生为主体, 更好地调动学生的积极性

现代教育认为知识是学习者在原有知识和经验基础上的主动建构.而非被动的接受或吸收, 学习者是学习的过程中起决定作用的内在因素[3]。开放性教学在内容和过程等方面体现了开放性和自主性, 以学生为中心, 学生可以根据自己的兴趣和认知方式来选择更适合自己的内容和过程, 更符合学习过程中学习者的认知规律[4]。在整个开放性实验过程中教师的角色不是指示者, 而是组织者、引导者、协助者, 为学生提供资源, 就学生的推理过程进行提醒和启发, 对学生的认知做出反馈, 鼓励他们对信息的批判性评价, 帮助学生在问题讨论中协调、整合基本知识与实际技能等[5]。如此构建了一个以学生为主体, 教师为协助者的学习环境, 给学生强大的内在学习动力, 发挥学生的主动性和积极性, 优化了教学过程, 改进了教学模式, 提高了实验教学的质量。

运用开放式教学方法对教师提出了新的要求

传统实验对学生实验成绩的评价主要是通过实验取得的结果是否与设计结果相吻合。而开放式教学因其选题和实验过程的自主性, 在新评价方式中, 学生的实验结果不再是评价的主要依据, 学生在实验过程中体现出的思维能力, 综合能力和创新能力才是评价的重点。另外, 由于教学中包含了基础实验和开放性综合实验两大部分, 这就要求教师在教学中要处理好实验基本技能训练与综合创新能力培养的关系。既要有足够的基本知识和操作内容的学习和训练, 又要给学生足够的时间自行查阅文献、收集资料、设计实验方案, 开展综合实验。总之, 开放式实验教学方法在传统实验教学中引入了新内容, 更加以学生为中心, 调动和激发了学生的主动性和积极性, 一方面训练学生的基本实验技能, 一方面培养了学生的创造性思维能力、探索精神和科学素养。因此开放性实验是一种更为理想的实验教学模式。但同时对教师也提出了新要求, 怎样更加合理地运用这种教学方式还需要高等教育工作者共同努力和探索。

摘要:开放式实验教学的实验内容更加丰富, 更能调动学生的主动性和积极性, 通过教师的引导, 既能训练学生的基本实验技能, 又培养了学生独立思考、自主学习的能力、创新能力和综合素质。开放式教学法在微生物实验教学中体现出其优点, 是一种更合理的教学模式。

关键词:实验教学,开放式,微生物实验

参考文献

[1]梁盛年, 李充璧, 付莉.改革微生物实验教学努力提高其教学质量[J].肇庆学院学报, 2006, 27 (5) :59-60.

[2]杨国亮.突破传统建构实验教学新模式[J].理工高教研究, 2005, 24 (1) :66-67.

[3]陈搏.臧伟进.现代教学理念与策略之剖析[J].中国高等医学教育, 2005, (3) :22-24.

[4]王子康.论新型的实验教学模式——开放性实验教学[J].重庆工商大学学报 (自然科学版) , 2003, 2O (3) :106-107.

8.动物学实验教学改革的探索与实践 篇八

【关键词】动物学 实验教学 教学改革

【中图分类号】Q95-4 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089(2016)09-0046-01

在我们学校,动物学实验作为对理论课程的补充安排在大二的第一学期,在理论课后1~2周开课。我们希望通过实验课的教学,加深和巩固学生对理论课所学知识的理解,使学生掌握动物学的基本操作技能,提高学生的动手能力、独立工作能力和观察分析问题的能力;培养学生科学严谨的治学态度和实事求是的学风[1]。

目前我们的实验教学缺少现代化的教学设备;实验动物局限于比较常见的、容易获得的。在这种情况下要更好地培养学生的能力,我们进行了以下改革的探索和实践。

1.精心选择合适的教材

我们使用的教材是高等教育出版社出版的《动物生物学实验指导》(第3版),由黄诗笺和卢欣主编。该教材内容分为基础性实验、自选性和设计性实验两部分,既包含了各主要门类代表动物的形态观察、内部解剖与比较分析、生命活动及分类等,又融入了较新的科研和教学研究成果。书中的插图,全部为高清晰度的原创实物彩色照片,非常形象直观。该教材还有配套的数字课程资源,具有补充、拓展纸质版教学内容,加强教学效果,为学生进一步提供自主学习平台和创新思维的作用[2]。有了这本教材,课堂以外学生也可以根据自己的兴趣去实践。

2.合理设置实验内容

我们的实验教学共24学时,每次课4学时,一共可以安排6个实验。我们在实验内容的设置上以基础性实验为主,包括细胞制片与观察和细胞大小的测量、动物组织装片的观察、动物早期胚胎装片的观察以及虾、鲫鱼、牛蛙、鸡和小鼠这几种代表动物的解剖实验。虾我们经常在餐桌上吃到,学生们很熟悉,在实验课上能深入地认识其结构大家觉得很有意思;鲫鱼是水生脊椎动物,牛蛙是从水生向陆生过渡的脊椎动物,将两者放在一起比较,能让学生们充分认识脊椎动物在从水生向陆生进化过程中器官系统的演化规律,理解结构与功能之间的关系及与环境的密切联系[3];鸡我们用来做骨骼标本,实验方法源于往届学生毕业论文的探索,这个实验我们还能兼顾外部形态观察和内部结构的识别,每次给学生演示胸大肌和胸小肌的作用时,大家都觉得好神奇,热情一下就调动起来了;小鼠作为一种常用的实验动物,在科研上面的用途非常多;其他动物的相关知识则可以通过教材配套的数字课程资源加以补充。

3.多种教学方法合理利用

讲授法、演示法、边讲边做、分组讨论等方法都各有优缺点[4],因此我们在教学过程中注重多种方法合理利用,充分发挥各自的优势。每堂课开始的时候我们会对本次课的目的、内容和要求先进行简单的讲授,让学生做到心中有数。接下来的方法就因实验内容不同而异,如细胞临时装片的制备我们会先演示再让学生动手做;动物组织装片的观察,我们会边讲边让学生观察;在做鲫鱼和牛蛙的比较解剖时,老师先对解剖方法进行简单的演示,再让学生操作,自己辨认各结构,老师有针对性地进行指导;鸡骨骼标本的制作我们是分组进行的,课前布置预习任务,课上有针对性地讲解难点和注意事项,在学生操作时,老师进行简单的指导,大部分内容由学生课下完成。

4.教学与科研相结合,开发新的实验项目

在指导学生毕业论文时,我们设置了一些制作标本的项目,制作的标本可以用于以后的教学;另外,我们也探索一些新的实验项目的可行性,如前面提到的鸡骨骼标本的制作方法就是根据学生毕业论文的实验结果优化的。

5.考核方式的改革

以前课程的考核方式为平时的出勤、操作和实验报告占70分,期末理论考试占30分。现在我们将理论考试的30分换成了鸡骨骼标本的制作。学生们需要团队协作完成,而且大部分内容在课下进行,充分调动了大家的积极性,锻炼了动手能力,培养了团队合作的意识;评分也由老师评分变成了学生评分,老师对每个标本进行点评,每组选出2~3名学生代表分别对标本进行自评和互评,分别取平均值后按照自评30%和互评70%的比例算出最后得分,整个过程学生全程参与。

6.结语

经过以上改革措施,在现有条件下学生学习动物学的积极性有了明显的提高,动手能力也增强了。随着科学技术的发展,时代的进步,动物学实验的教学也要不断变化发展,我们将会结合学校自身条件,循序渐进,逐步推进。

参考文献:

[1]刘凌云,郑光美. 普通动物学实验指导(第3版)[M].北京:高等教育出版社,2010:1.

[2]黄诗笺,卢欣. 动物生物学实验指导(第3版)[M].北京:高等教育出版社,2013:Ⅱ.

[3]马纲,张敏.动物学实验教学设计的探讨[J]. 实验室研究与探索,2009,28(3): 123-124,137.

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